载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化:A:200ul感受态细胞加入连接产物后 轻

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/25 21:28:08
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载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?
将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化:A:200ul感受态细胞加入连接产物后 轻轻混匀 冰上放置30分钟 42度水浴90秒 冰浴2分钟 加入200ulLB液体培养基 37度摇床30分钟 然后涂板 4度冰箱 在往后是质粒DNA的转化 就是把连接产物换成了PUc19质粒了,其他步骤都一样 请问这是为什么呢?
那感受态细胞加入连接产物培养出的菌落跟感受态加入质粒培养出来的菌落,用哪个呀? 我的意思是筛选出重组子克隆是要从感受态细胞加入连接产物培养出的菌落选呢?还是感受态加入质粒培养出来的菌落里选呢?要是两个里面都有选哪个比较好,选出来了之后要质粒小量提取了吗?要从上面两个菌里哪个里提取呢??重点就是感受态细胞加入连接产物培养出的菌落跟感受态加入质粒培养出来的菌落哪个是质粒小提要提取的呢??求助高人们了指点一下我这个菜鸟吧

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PUC19是个正control,就是一定会出clone的,如果没有,就是操作步骤有问题
看你的protocol就是重复做一遍
这样的话还不如一起做
涂板以后直接放37度啊
补充:根据你的说法,从“连接产物”里面选,PUC19是正control了,你挑克隆只会挑到跟原来一样的,没有用的
ps:“连接产物”那也是个质粒

载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有了一次转化 为什么到后面又要转化呢?将载体与插入片段连接上之后,进入到宿主细胞转化:A:200ul感受态细胞加入连接产物后 轻 请问将载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有个一次转化 为什么到后面又要用质粒转...请问将载体与插入片段连接好后 进入宿主细胞转化 这个时候已经有个一次转化 载体是怎么进入宿主细胞的 如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线(包括基因和载体的连接、转化和鉴定)和关键点. 青霉素抗性基因,切割后在DNA连接酶的作用下与载体连接产生3种连接产物,目的基因-目的基因连接物;目的基因-载体连接物;载体-载体连接物.将这些产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转 最近在做转化实验,转化到大肠杆菌里面,请问一下什么是假阳性啊是不是指载体没有与目的基因连接,就直接进行转化,如果是这样,在进行“蓝白斑”筛选时,原理是当外源片段插入到载体质粒 目的基因通过载体进入到受体细胞后,和载体一起复制共存,还是插入到细胞内的DNA上了? 转化到大肠杆菌中的质粒会甲基化吗?看到文献说大肠杆菌中的质粒会甲基化,那么用T载体与目的片段连接后转化到大肠杆菌中,会被甲基化吗?急, 效应T细胞与宿主细胞结合后 宿主细胞渗透压会降低还是升高 PCR纯化产物与T载体连接后放置两天影响转化吗 噬菌体侵染细菌 DNA进入宿主细胞 蛋白质留在外面 那么宿主细胞裂解后 母体噬菌体还活着么``` 目的基因片段与载体DNA连接的主要有? 在我做的载体与片段连接中,在转化后,酶切后质粒是不长的,而重组后的长了,可是,最后结果却是.结果是,片段根本没有连进去,连进去的却是一个远远大于我的目的片段的碱基序列,这是为什么 如何将两个外源基因导入到一个质粒载体?有一段平末端编码人VEGF基因的DNA片段,怎样将其插入到含有EcoRI和BamH I限制位点的PET28a载体中去?插入后重组载体转化大肠杆菌DH5.我们要插入这个外源 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带(即之前的连接产物,约3k 约1800长度的片段,pcr扩增后显示长度合适,进行t-blunt载体克隆,转化感受态细胞,长出菌很少,甚至没有 进入宿主细胞的病毒有多少种核酸例如RNA病毒进入宿主细胞发生逆转录后,能不能说此时病毒有2种核酸... 艾滋病毒中的蛋白质会不会进入宿主细胞