怎样确定一个蛋白质中二硫键的位置

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2025/01/09 07:37:03
怎样确定一个蛋白质中二硫键的位置怎样确定一个蛋白质中二硫键的位置怎样确定一个蛋白质中二硫键的位置二硫键位置的确定一般用蛋白酶水解带有二硫键的蛋白质,从部分水解产物中分离出含二硫键的肽段,再拆开二硫键,

怎样确定一个蛋白质中二硫键的位置
怎样确定一个蛋白质中二硫键的位置

怎样确定一个蛋白质中二硫键的位置
二硫键位置的确定
一般用蛋白酶水解带有二硫键的蛋白质,从部分水解产物中分离出含二硫键的肽段,再拆开二硫键,将两个肽段分别测序,再与整个多肽链比较,即可确定二硫键的位置.常用胃蛋白酶,因其专一性低,生成的肽段小,容易分离和鉴定,而且可在酸性条件下作用（pH2）,此时二硫键稳定.肽段的分离可用对角线电泳,将混合物点到滤纸的中央,在pH6.5进行第一次电泳,然后用过甲酸蒸汽断裂二硫键,使含二硫键的肽段变成一对含半胱氨磺酸的肽段.将滤纸旋转90度后在相同条件下进行第二次电泳,多数肽段迁移率不变,处于对角线上,而含半胱氨磺酸的肽段因负电荷增加而偏离对角线.用茚三酮显色,分离,测序,与多肽链比较,即可确定二硫键位置.
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还有一种方法,
蛋白质中二硫键的定位及其质谱分析

应该就在肽键附近吧...

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