我最近在做microRNA的茎环RT-PCR,然后用PAGE电泳时,总是有很多非特异性的条带.请问大家在做这方面的时候也遇到了吗?该怎么办呢?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/18 15:13:54
我最近在做microRNA的茎环RT-PCR,然后用PAGE电泳时,总是有很多非特异性的条带.请问大家在做这方面的时候也遇到了吗?该怎么办呢?我最近在做microRNA的茎环RT-PCR,然后用PAG

我最近在做microRNA的茎环RT-PCR,然后用PAGE电泳时,总是有很多非特异性的条带.请问大家在做这方面的时候也遇到了吗?该怎么办呢?
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miRNA由于太短,引物序列可优化范围很小,rt-pcr很容易有非特异性,很多引物都采用LNA来提高退火温度增加特异性.经环方法由于增加了一步特异性反转录理论上更提高了特异性,但结果可能仍不够理想.建议进一步提高退火温度试试,若不行只能继续优化引物甚至用LNA.若是公司设计的就打技术支持的电话吧

我最近在做microRNA的茎环RT-PCR,然后用PAGE电泳时,总是有很多非特异性的条带.请问大家在做这方面的时候也遇到了吗?该怎么办呢? 我最近想设计茎环结构的引物克隆MicroRNA,但不知我发给引物公司的单链引物,在我试验时是自动形成茎环结构,还是要在引物合成后进行相关的处理才会形成茎环.此引物是做miRNA逆转录用的, microRNA茎环引物设计及RT-PCRmicroRNA的茎环引物可以自己设计吗?是不是线性序列发到公司合成就行?有没人已经做过该实验?microRNA定量时的内参一般选择哪些?在反转录的时候因为内参基因的反转 microRNA茎环引物及PCR上下游引物设计和扩增原理我在文献上看到一些用茎环引物反转录microRNA时,接下来的PCR的上游引物是包含了microRNA的5‘端一部分序列,而下游通用引物则为茎环上的一部分 microrna芯片检测的实验怎么做 哪家公司做MicroRNA蛋白水平实验做的最好?最好公司在重庆 哪里在做MicroRNA慢病毒介导基因调控的服务? 哪家公司在做MicroRNA慢病毒介导基因调控的服务? 提取出来的microRNA可以在-80°C条件下储存多久不会降解,并且还可以继续RT-pcr 做microrna的pcr需要细胞数量最少多少 microRNA茎环引物设计的具体步骤及注意事项?如果交给公司去做大约需要多少钱? microRNA茎环引物如何设计的?最好能有实例举证, microRNA的意思是什么? 最近在做实验RT-PCR,我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀 哪家公司的MicroRNA动物实验做的好,请问如何收费的? 哪里的MicroRNA动物实验做的好,请问如何收费的? 有人做过或接触过microRNA的paired-end测序数据分析吗 microRNA的作用机制是怎样的?