重组质粒后为什么还需要双酶切、PCR鉴定并测序分析

重组质粒后为什么还需要双酶切、PCR鉴定并测序分析 重组质粒后为什么还需要双酶切、PCR鉴定并测序分析 （鉴定质粒表达）比较菌落PCR和提质粒酶切这两种方法的优缺点,为什么需要两次鉴定? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 重组质粒鉴定pcr没条带,酶切有条带我有两种重组质粒,两个基因片段大小一样,我的重组质粒都与空质粒大小相差300左右,但是用0.9%的胶140v电泳,无法区分大小,重组质粒进行双酶切,都出现了疑 为什么对重组质粒DNA进行双酶切 转化后的重组子进行PCR,扩增出来的是目的基因还是整个质粒?为什么DNA测序是在转化后才进行? 问个很菜的问题：在跑完pcr以后目的基因已经扩增了很多了,然后再切胶纯化后应该就可以用来去测序了,为什么还要进行后面的连接转化重组质粒的抽提和酶切鉴定啊,他们有什么意义? 菌落PCR技术鉴定阳性重组菌落PCR扩增的序列是环状的质粒,还是线性的质粒呢?那载体通用引物是什么呢?用它扩增的是哪段序列呢? 质粒构建的过程中,如果是想把α基因与A质粒重组,但为什么要先与一个B质粒先重组再构建呢?就算这个可能是鉴定α基因是不是被正确提取,但是为什么与B质粒重组的重组质粒不能鉴定基因是 如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶 都说双酶切只能产生1种重组质粒,而且有的资料说单酶切产生的重组质粒是两个.为什么在2009年江苏高考34题中用双酶切时,答案却是两种重组质粒,而单酶切时产生的重组质粒是一个. 空质粒pEGFP-N1能用菌液PCR鉴定吗? 基因重组为什么需要DNA聚合taq酶?taq酶不是PCR里的吗,基因重组为什么需要? 为什么用IPTG诱导蛋白没表达?双酶切及PCR验证目的片段连到表达载体pET28a上了(所用的内切酶是BamH1,Hind111).重组质粒转化BL21,试了不同的IPTG浓度,诱导温度,就是没蛋白表达.后来重组质粒转化JM10 琼脂糖凝胶电泳双酶切为什么没有目的基因条带我用的10000的MARKER,我的重组质粒有6000多BP,质粒5300多BP,电泳后发现只有重组质粒的条带和切下来的质粒条带,在1000BP左右并没有发现我目的基因 重组质粒进行双酶切鉴定时电泳结果显示对比质粒（就是重组质粒）的条带,在酶切后大、小片段的中间理论上不是应该对照质粒的条带在最后面的么?什么原因呀?质粒是用玻璃纤维住快速抽