酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/25 12:48:34
酶切后PCR一条带都没有但原质粒PCR有条带为什么做MUCIN基因从扩增、切胶纯化、加A、T载体链接、转入感受态到挑克隆鉴定出阳性克隆最后提质粒取一部分提出的质粒双酶切质粒与酶酶切后PCR一条带都没有

酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶
酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么
做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶切产物同时跑电泳鉴定 原质粒有条带 可是酶切一条也没有 为什么

酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶
什么酶呢?最后酶切组的电泳条带是弥散,是只有质粒条带没有酶切产物条带,还是干脆就是空白?
如果是弥散,最有可能的是所用的酶的反应条件要求比较严格,因为掌握不当而产生了星号活性,导致把质粒切碎了.建议查一下所用酶的酶切条件.
如果是有质粒条带而没有短片段条带,也就是说没切开了.可能酶切位点发生了突变,也可能是酶失活了.
如果是空白...我也不知道怎么回事儿了...再重复一次吧.
如果认为之前的步骤都没什么问题,不如直接送测序.比酶切检验还要精确呢.
祝实验顺利.

控制消化时间，先单酶切看看。还有，你那个质粒的条带亮不亮？如果比较模糊，由于浓度太低，就可能出现酶切后什么都没了的情况。

降解了。

提取的质粒浓度太低也说不定，碱抽时最后一步加的TE量是不是太多呢？！
或者你的酶已经被污染了，因为非特异性酶切的产生，导致所得到的片段都很小，在电泳结束时已经跑出了胶。这种情况下可以短时间跑胶看看结果，不过感觉可能性不大。。...

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提取的质粒浓度太低也说不定，碱抽时最后一步加的TE量是不是太多呢？！
或者你的酶已经被污染了，因为非特异性酶切的产生，导致所得到的片段都很小，在电泳结束时已经跑出了胶。这种情况下可以短时间跑胶看看结果，不过感觉可能性不大。。

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酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶 菌液PCR有条带,但提不出质粒,为什么? 【求助】菌落PCR有目的条带与菌液PCR却什么都没有? 【求助】菌落PCR有目的条带与菌液PCR却什么都没有? PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次 质粒DNA酶切电泳图怎么分析(第二条带为质粒,第三条带为酶切片段,由于实验时没有PCR,所以只有两条带） 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 做PCR以后,跑电泳.结果一条带都没有,为什么我们做的是RT—PCR,用的是琼脂糖凝胶电泳 PCR跑电泳每次都有条带但都不亮怎么找原因?PCR跑电泳每次都有条带但都不亮怎么找原因 PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 挑克隆鉴定时PCR有目的条带但是酶切没有做分子克隆时,铺板长出很多菌落,于是挑克隆鉴定.PCR扩增目的基因有目的条带,但是酶切重组质粒又只有一条带,酶切时间已经延长至过夜了.挑了好多 电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么 在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来 DNA PCR扩增我想问DNA样品检测中有很亮的特异性条带,但为什么经过PCR扩增却是什么都没有那,试过好多条件都没成功 PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的. PCR电泳,为什么没有条带啊?PCR电泳,第一次跑,一条带都没有.第二次,六条带又有一条没有,这样的情况以前也出现过一次.可以保证到转录出CDNA这一步没有出错,之后操作也没出错.为什么没有了