PCR反应温度怎么设置?由于刚刚开始做实验,什么都不懂,PCR引物的Tm值一条为50.6一条为54.3目标片段为195bp请问PCR反应程序该怎么设计啊?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 03:31:48
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PCR反应温度怎么设置?由于刚刚开始做实验,什么都不懂,PCR引物的Tm值一条为50.6一条为54.3目标片段为195bp请问PCR反应程序该怎么设计啊?
PCR反应温度怎么设置?
由于刚刚开始做实验,什么都不懂,
PCR引物的Tm值一条为50.6
一条为54.3
目标片段为195bp
请问PCR反应程序该怎么设计啊?

PCR反应温度怎么设置?由于刚刚开始做实验,什么都不懂,PCR引物的Tm值一条为50.6一条为54.3目标片段为195bp请问PCR反应程序该怎么设计啊?
你的一对引物的TM值最好不要超过3℃,退火温度的一般比TM值低5℃,太低的退火温度会导致非特异性的扩增
反应参数可以设为:
94℃ 2 m
94℃ 30s }
50℃ 30s } 30cycles
72℃ 30s }
4℃ ∞
若是无目的条带,可将退火温度调低2°C

PCR反应温度怎么设置?由于刚刚开始做实验,什么都不懂,PCR引物的Tm值一条为50.6一条为54.3目标片段为195bp请问PCR反应程序该怎么设计啊? 最近在做实验RT-PCR,我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀 PCR仪是如何控制温度的,为什么能在一定范围内想设什么温度就什么温度,不同温度间的设置怎么就没什么缓冲换句话就是,PCR仪的工作原理,注意不是PCR反应的原理 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? 做PCR如何设置条件 PCR反应过程中由于程序设定错误需要中途停下来重新开始,是否会有影响? PCR实验设置延伸反应的原因PCR实验设置延伸反应的主要原因是什么? 怎样确定pcr反应温度有引物了,怎样跟引物设置一个好的反应体系温度,有没有计算公式,知道的说下, pcr退火温度怎么确定? pcr退火温度怎么确定 巢式pcr 怎么做 如何优化pcr反应中的退火温度 如何优化PCR反应中退火温度 在PCR反应中如何设置对照实验 在PCR反应中,如何设置对照组 pcr扩增反应中设置延伸的原因 梯度PCR怎么做我们的PCR仪是12*8孔的,但我只想放5个反应管试不同的温度,那个温度梯度是均匀分布于12孔,然后自己找想要的反应温度对应放置5个反应管吗 定量PCR重复性问题我做定量PCR有一段时间了,但经常会出现相同的模板,不同反应板出来的结果出现较大差异.开始我认为可能是反复冻融造成cDNA的降解,但将cDNA分装后还是会出现这种现象.由于