相对定量PCR是用目的基因拷贝数/内参拷贝数,还是用2-ΔΔCt值去分析?为什么有的文献是直接用前者?

相对定量PCR是用目的基因拷贝数/内参拷贝数,还是用2-ΔΔCt值去分析?为什么有的文献是直接用前者? 还想再向您请教下 关于荧光定量PCR 相对定量内参基因的选择,如果我想用18SrRNA,我该怎么得到这个内参呢 我是新手,在相对定量PCR中,采用2 -△△Ct 我在文库中看到,有两个假设的前提,一是目的基因与内参基因扩增效率相同；二是目的基因与内参基因扩增效率相同等于1；两个假设成立才能用这种 请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确?那么怎么平衡扩增效率呢? rp49基因是什么基因,很多做半定量PCR的用这个基因做内参,想了解下该基因是否是rRNA 用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是配50ul的内参基因pcr反应体系,分几 PCR 内参 跑胶我跑半定量PCR的时候,内参出来的亮度不一致,有的 泳道很亮,有的暗一些,那我这张图还可以用吗,因为有人说内参的亮度应该保持一致?不是只要比目的基因和内参的灰度值来比较 定量PCR中,用内参基因进行标准化,为什么要用几何平均, 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! 用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是在一个管里配50ul的内参基因 半定量rt pcr内参和目的基因的引物加的量相同吗,能否放在同一管中跑PCR southern杂交与荧光定量PCR鉴定拷贝数的优缺点是什么?鉴 定植物基因的拷贝数,southern是不是不是很可靠,具体体现在哪一方面? 我现在要做荧光定量PCR,有3个目的基因,以ACTIN基因作为内参,分析其在根茎、根、茎、叶的表达情况,现在我不清楚应该怎么做,具体步骤是怎么样,我用的是SYBR® Premix Ex TaqTM这个试剂盒,电泳 请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct值在25左右 我准备做定量PCR,需要检测的基因大约有10个左右,请问我需要多少个内参基因?只用1个内参行不行?我们实验室经常用18S和β-actin两个内参,是不是内参越多越好?怎样去选择最合适的内参基因呢 pcr产物电泳时,用反转的dna的同一个样分别扩内参、目的1和目的2.内参和目的1都很好,目的2却很浅很浅?三者因所用退火温度,循环数不同,是分三次分别扩增的.之后电泳结果时内参和1非常好,2 荧光定量PCR相对定量,目的基因引物浓度不同,b-action需要以不同浓度扩增2次吗? 荧光定量pcr扩得出目的基因但是检测不到内参gapdh我做的是肿瘤细胞,目的基因smo.还有就是经常有3个重复孔内有一个扩不出东西,是由于引物或模板加少了么