抗性基因或标记基因在质粒上的话,它怎么起到检验目的基因的作用?我想应该加不加目的基因原来的质粒也有抗性吧 怎么筛选
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 02:52:43
抗性基因或标记基因在质粒上的话,它怎么起到检验目的基因的作用?我想应该加不加目的基因原来的质粒也有抗性吧 怎么筛选
抗性基因或标记基因在质粒上的话,它怎么起到检验目的基因的作用?
我想应该加不加目的基因原来的质粒也有抗性吧 怎么筛选
抗性基因或标记基因在质粒上的话,它怎么起到检验目的基因的作用?我想应该加不加目的基因原来的质粒也有抗性吧 怎么筛选
如果是做基因克隆的话,可以直接用蓝(兰)白斑筛选.一般的克隆载体上有Lac Z基因,在IPTG和X-gal作用下能产生蓝斑,而此基因中间有多克隆位点,当你的片段基因插入时,把这个基因给破坏了,不能产生兰斑,而只是产生白斑.这样就区别开来,象PUC18/19,PBR322等最常用的质粒都有Lac Z基因.
如果是想做基因表达,就没有这样好的方法了,只能是筛选,挑上十个斑,去小摇一回,做酶切,看大小(一般三五个会挑出一个来,如果运气实在不好,十个确定是会有一个的).大小对了再去测一下序.测序正确,再进行下一步表达.
就是说目的基因的导入与否可以根据标记基因是否导入来判断,因为他们都在质粒载体上
检测的话要在个体水平上 比如抗性基因 抗四环素抗性基因,讲重组质粒导入不含四环素的大肠杆菌中,然后接种在一个含四环素的培养皿里面培养,一段时间后观察细菌生活状况,如果成功导入抗四环素抗性基因的大肠杆菌就能够存活下来,如果导入失败的话,则会死忙
从而把存活的含有抗性基因即目的基因的大肠杆菌培养起来,提取表...
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就是说目的基因的导入与否可以根据标记基因是否导入来判断,因为他们都在质粒载体上
检测的话要在个体水平上 比如抗性基因 抗四环素抗性基因,讲重组质粒导入不含四环素的大肠杆菌中,然后接种在一个含四环素的培养皿里面培养,一段时间后观察细菌生活状况,如果成功导入抗四环素抗性基因的大肠杆菌就能够存活下来,如果导入失败的话,则会死忙
从而把存活的含有抗性基因即目的基因的大肠杆菌培养起来,提取表达产物
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一般把目的基因插入到抗性基因片段中,这样抗性基因就被破坏了,菌株将不再具有抗性,而未插入的则具有抗性,通过抗性筛选选择