基因工程使用双酶切和单酶切双酶切的时候会把质粒变成两段DNA分子,会不会存在又变回质粒的可能?把质粒切开两段以后,怎么把要和切过的目的基因重组的那一段提取出来?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 14:54:03
基因工程使用双酶切和单酶切双酶切的时候会把质粒变成两段DNA分子,会不会存在又变回质粒的可能?把质粒切开两段以后,怎么把要和切过的目的基因重组的那一段提取出来?基因工程使用双酶切和单酶切双酶切的时候会

基因工程使用双酶切和单酶切双酶切的时候会把质粒变成两段DNA分子,会不会存在又变回质粒的可能?把质粒切开两段以后,怎么把要和切过的目的基因重组的那一段提取出来?
基因工程使用双酶切和单酶切
双酶切的时候会把质粒变成两段DNA分子,会不会存在又变回质粒的可能?
把质粒切开两段以后,怎么把要和切过的目的基因重组的那一段提取出来?

基因工程使用双酶切和单酶切双酶切的时候会把质粒变成两段DNA分子,会不会存在又变回质粒的可能?把质粒切开两段以后,怎么把要和切过的目的基因重组的那一段提取出来?
双酶切之后,由于用的两种酶切出来的粘性末端序列不一样,所以一般载体不会再自连.而你说的载体和基因片段再重新连起来,也是不太可能的,因为连接反应是需要ATP提供能量的,酶切体系里面没有ATP,所以不会再连接.
质粒切开后,一般是通过琼脂糖凝胶电泳的方法,把大小不同的两个片段分离开,然后把想要的片段通过切胶回收提纯的方法得到.