使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选?如题:追加20-30分使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选(筛选转化后的大肠杆菌)?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/13 04:35:35
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使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选?
如题:追加20-30分
使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选(筛选转化后的大肠杆菌)?

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空载体吗?不用筛选 如果你操作没问题的话,转化率100% ,不过还是要验证的.提质粒做酶切验证了,分别做个单酶切和双酶切.单酶切用来判断质粒的大小,双酶切用来看是否就是该质粒,不过尽量选位点相距较远的酶切位点,100bp以下的小片断电泳很难观察到.

使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选?如题:追加20-30分使用pcDNA3.1载体转化大肠杆菌后,如何进行筛选(筛选转化后的大肠杆菌)? pcdna3.1作为载体的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选酶切了hindⅢ和EcoRⅠ, 如何向PCDNA3.1 载体上加入FLAG标签? 载体是pcdna3.1,感受态可以用哪种?有没有特别的限制? 转化到大肠杆菌中的质粒会甲基化吗?看到文献说大肠杆菌中的质粒会甲基化,那么用T载体与目的片段连接后转化到大肠杆菌中,会被甲基化吗?急, 您好转化大肠杆菌中什么叫入门载体,然后他又和什么载体交换? 在用表达载体转化大肠杆菌时,常用什么处理大肠杆菌? 质粒转染细胞不表达的问题~想研究某跨膜蛋白,构建真核表达质粒(构建了多种,载体有PCDNA3.1-FLAG,PCDNA3,1-V5,PCMV-5'端MYC,PCDNA3-5'FLAG,PCDNA3-5'HA),转染始终不表达,细胞换过293T,AD293,COS1,COS7等,转染操 本人实验,现在手上有pCDNA3.1-EGFP载体,现在想在载体上插入目的基因PTEN片段,应该怎么做? pcDNA3.1和pcDNA3 有什么区别么? 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带(即之前的连接产物,约3k 转化大肠杆菌超级感受态(购买)已经1年不成功,我实在没办法,只有发帖求助了,望热心有志之士不吝赐教!转化前载体与DNA于16℃连接12h,感受态冰上化冻后立即加入连接产物,冰上放置20-30min, 利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是_________________.在用表达载体转化大肠杆菌时,常用____处理大肠杆菌,以利于表达载体进入: 用pcDNA3.1(+)作为表达载体,设计PCR引物时怎么能保正不移码?起始密码子前的碱基个数应该是多少? 如何将两个外源基因导入到一个质粒载体?有一段平末端编码人VEGF基因的DNA片段,怎样将其插入到含有EcoRI和BamH I限制位点的PET28a载体中去?插入后重组载体转化大肠杆菌DH5.我们要插入这个外源 我构建了一个基因的真核表达载体,转染293T细胞后以空质粒PCDNA3.1及未转染质粒的孔为对照,还有一个以PBS代替一抗的未转染质粒的孔为对照,结果只有PBS代替一抗的孔未被染色,其余孔都被染色 大肠杆菌遗传物质的载体是 pcDNA3.1的多克隆酶切位点有哪些