农杆菌 和大肠杆菌怎么区别
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2025/02/01 06:29:57
农杆菌 和大肠杆菌怎么区别
农杆菌 和大肠杆菌怎么区别
农杆菌 和大肠杆菌怎么区别
现在鉴定细菌常用的方法就是利用16SrDNA.
你只需要区分农杆菌和大肠杆菌,这就太简单了,设计一对能扩16SrDNA的引物（比如27F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3' ；1492R：5'-TACCTTGTTACGACTT-3'）,抽提两种菌的基因组DNA,做PCR,然后拿去测序.将得到的序列在NCBI网站BLAST,就可以看到哪个菌跟大肠杆菌同源性高,哪个跟农杆菌同源性高了.至于原理,你可以看看以下链接,一句两句话说不清楚.http://www.labsky.com/data/06/02/communion/0205133748491.htm
当然,如果你还在读高中,如果你连PCR是怎么回事都不知道,那就算我没说吧.可能还有其他更简单的方法来区别,比如显微镜形态观察等.
可以用基因工程的知识呀，不过操作比较麻烦
你先构建基因载体，然后去侵染双子叶植物，如果可以侵染成功就是农杆菌，否则是大肠杆菌
PCR 扩增16s rDNA序列，然后测序比对，这是最准确的方法。
此外如果怕浪费钱，可以比较二者培养温度，农杆菌（G3101,LBA4404,EHA105）最适生长温度在30度或28度，2天长出单菌落。而37度下基本见不到生长（据说长时间放在37度会导致死亡；冻融转化的时候37度仅仅放2min左右，而且已经是一种刺激了）。
而大肠杆菌在37度14个小时左右就可以见到明显的单菌落。...
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PCR 扩增16s rDNA序列，然后测序比对，这是最准确的方法。
此外如果怕浪费钱，可以比较二者培养温度，农杆菌（G3101,LBA4404,EHA105）最适生长温度在30度或28度，2天长出单菌落。而37度下基本见不到生长（据说长时间放在37度会导致死亡；冻融转化的时候37度仅仅放2min左右，而且已经是一种刺激了）。
而大肠杆菌在37度14个小时左右就可以见到明显的单菌落。
所以你可以铺四个板子，两个放在30度两个放在37度，比较一下就出来了
另外，农杆菌通常除了质粒所携带的抗性外还有一种抗性存在，比如G3101用庆大，LBA4404用链霉素。这样也可以通过划双抗平板区分。
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这……你问的是它们的不同点，还是问怎么通过实验来区别呢？
如果是后者，试一下参考艾弗里的实验好了
用同位素标记的T2噬菌体侵染样本
T2噬菌体是专门侵染大肠杆菌的
培养一段时间后，进行离心。如果试管下部有放射性，上部几乎没有，那么是大肠杆菌，如果放射性都在上部，那么是农杆菌。。
不懂有没答偏了，还是有简单的办法。。...
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这……你问的是它们的不同点，还是问怎么通过实验来区别呢？
如果是后者，试一下参考艾弗里的实验好了
用同位素标记的T2噬菌体侵染样本
T2噬菌体是专门侵染大肠杆菌的
培养一段时间后，进行离心。如果试管下部有放射性，上部几乎没有，那么是大肠杆菌，如果放射性都在上部，那么是农杆菌。。
不懂有没答偏了，还是有简单的办法。。
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