已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长急用,非常感谢!

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/22 13:21:39
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我设计引物是用Omiga软件的,使用比较简单,只要新建一个核酸文件,把目的基因序列粘贴进去,扩增全长的话一般都是手工选取18~22bp长度,再加入内切酶碱基和保护碱基
(上游引物从第1个碱基开始,下游引物是从最后一个碱基开始往前选,记得下游引物要取反向配对的,选取好之后用Omiga软件里面的一个test Primer的功能,积分小于12就可以用了.然后在两条引物的5‘端加上你准备用的限制性内切酶的碱基序列,并加适当数量的保护碱基)
记住PCR扩增出来之后先电泳鉴定然后纯化,酶切,测序鉴定,全部没问题的话就可以和你的载体连接了.

已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长急用,非常感谢! 有关基因克隆的问题请问我现在知道洋葱某个基因的中段序列,并且已经提取出了总RNA并进行了反转录.请问如何根据中断序列设计引物并克隆出全长基因?请尽量简单易懂些,我只是个高中生, 有关基因克隆的问题请问我现在知道洋葱某个基因的中段序列,并且已经提取出了总RNA并进行了反转录.请问如何根据中断序列设计引物并克隆出全长基因?请尽量简单易懂些,我没什么基础. 有一已知序列(1516bp)的基因,现在想要克隆这个基因,请问引物怎样设计?能不能直接克隆出全长?还有就是,一般所说的启动子,终止子在什么位置?如果要设计酶切位点的话该怎么办?我是菜鸟, 如何设计随机引物我是想克隆一段 已经转入水稻基因组的 外源基因。打算设计一对引物 其5‘端使用随机引物,中间用特异性内切酶序列,3’端使用已知目的基因两端序列。(因为完全使 我的目的基因目前只知道部分序列,现在需要克隆出这个基因全长来,我已经合成了RACE模板及引物,进行了PCR,一直没有出来目的条带 设计简单的引物;如何通过PCR获得目的基因 一条非全长基因序列荧光定量pcr引物如何微调(指用primer或primerselect设计出的引物总是不太好) 已知一个基因的mRNA和cDNA,我想克隆此基因,进行转染表达,但是设计的引物无法扩增出目的片段……急求!我目的片段大小为2800,载体为eGFP-N1,设计引物中,我是取了ATG开始的前20个左右的碱基,加 设计实时定量PCR引物是根据基因的全长设计引物还是根据基因的开放阅读框设计引物? 【求助/交流】未知序列如何测得基因全长?如何从全长中筛选目的基因 【求助/交流】未知序列如何测得基因全长?如何从全长中筛选目的基因 我有一段目的基因,需要构建表达载体,此时是扩增目的基因的全长还是?我用premier 5.0设计引物,然后扩增产物长度是200多,但我的目的基因是700多.需要构建表达载体,是扩增目的基因全长吗? 关于引物设计要对目的基因进行定量分析,基因全长1932NT,是不是只要选择其中的一段就行了,长约400NT左右,那么这一段应如何选?该基因的保守序列吗?该怎么确定一段基因是否是保守序列?我在G 我想从小麦上克隆G蛋白β基因,如何设计引物? 设计引物目的基因前延后延我设计引物,后期做表达.想要把目的基因前加500bp及后加500bp现在的问题是,我在查结核杆菌全长时发现两个连续的基因之间有一些bp的间隔现在的问题是,我是按基因 一段目的基因,帮忙设计引物.ACATGATTACGAATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGATTGAATGCCATGGTGATGGGAGGTAGTCTGGATGGAGATTGGCAGAAATGTTCAGCAACCTTTGACTGCAGTGAACGGGCTGTACAGGGTTATATGGCACGGTACGCAACCTATGCCCGTCTAGAGCATAATCCTACCTGTGAGGATTTTGCGCGGATACACAACGG 已知动物PRL基因序列如何设计引物 已解决