大肠杆菌中依赖于甲基化的限制系统有哪些?各有何特点?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/23 06:00:00
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大肠杆菌中依赖于甲基化的限制系统有哪些?各有何特点?
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限制和修饰现象在上个世纪中期被人们所发现,到 2005年1月,已经发现 4342 种限制酶和甲基化酶,其中限制酶有 3681 种.限制性内切酶有特定的识别位点和切割位点,切割后可产生平末端或粘性末端.酶切有标准的反应体系,受末端长度的影响,有位点偏爱性,在极端非标准条件下会产生星星活性.通过酶切连接可以增减酶切位点,酶切位点在基因组中的分布是不均匀的.大肠杆菌有三种甲基化酶和三种依赖于甲基化的限制系统.甲基化对限制酶切影响.基因操作常用的 DNA 聚合酶有大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ,T4、T7 DNA 聚合酶以及末端转移酶.为满足工作需要,还开发有 Klenow DNA 聚合酶,耐热 DNA 聚合酶以及反转录酶.除限制修饰酶和聚合酶以外,基因操作中还用到很多重要的酶,包括:连接酶、T4 多核苷酸激酶、碱性磷酸酶、核酸酶、琼脂糖酶、蛋白酶、溶菌酶以及一些 DNA 结合蛋白.
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