制备单克隆抗体的2个原理
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/15 13:26:53
制备单克隆抗体的2个原理
制备单克隆抗体的2个原理
制备单克隆抗体的2个原理
抗体主要由机体的B淋巴细胞合成,每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因.当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞.被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙,即克隆.如果选出一个合成一种抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆.单克隆细胞所合成的抗体即为单克隆抗体.
1、动物细胞融合
2、动物细胞培养
这就是制备单抗的原理。
将淋巴B细胞与骨髓瘤细胞动物细胞融合，
然后组织培养，进过至少两次筛选获得单克隆抗体。
也就是说，动物细胞融合，动物细胞培养。
二、实验原理： 骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能无限制增殖的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养基[含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养，未融合的脾细胞...
全部展开
二、实验原理： 骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖，但不能分泌特异性抗体；而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体，但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞，继承了两个亲代细胞的特性，既具有骨髓瘤细胞能无限制增殖的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养基[含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养，未融合的脾细胞因不能在体外长期存活而死亡；未融合的骨髓瘤细胞合成DNA的主要途径被培养基中的氨基蝶呤阻断，又因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶（HGPRT），不能利用培养基中的次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，因此能在HAT培养基中存活和增殖。经过克隆选择，可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞，在体内或体外培养，即可无限制地大量制备单克隆抗体。
收起
大家不要随便在网上找一段粘上就OK了 多替出题人想想
我把我笔记中精华处给你写上
原理 1动物细胞融合 （杂交瘤细胞与B细胞融合）
2细胞增殖 （要么体外培养 要么注入腹水）
再给你加个重点 两次筛选方法与作用
1单孔培养发 （选出杂交瘤细胞）
2选择性培养基 （选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞）
希望对你有用...
全部展开
大家不要随便在网上找一段粘上就OK了 多替出题人想想
我把我笔记中精华处给你写上
原理 1动物细胞融合 （杂交瘤细胞与B细胞融合）
2细胞增殖 （要么体外培养 要么注入腹水）
再给你加个重点 两次筛选方法与作用
1单孔培养发 （选出杂交瘤细胞）
2选择性培养基 （选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞）
希望对你有用
收起
标答：1.动物细胞融合 2.细胞的分裂分化
5楼请注意，你说的细胞增殖这是矛盾的，增殖是对于病毒而言的，而病毒根本没有细胞结构何谈细胞增殖一说呢?