为什么目的基因不能直接插入载体?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 21:59:54
为什么目的基因不能直接插入载体?
为什么目的基因不能直接插入载体?
为什么目的基因不能直接插入载体?
不行,
是这样的：
基因工程中作为载体使用的DNA分子很多都是质粒（plasmid）,即独立于细菌拟核处染色体DNA之外的一种可以自我复制、双链闭环的裸露的DNA分子.是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢?其实不然,作为基因工程使用的载体必需满足以下条件.
（1） 载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点,以便目的基因可以插入到载体上去.这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置,还必须是在质粒本身需要的基因片段之外,这样才不至于因目的基因的插入而失活.
（2） 载体DNA必需具备自我复制的能力,或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制.
（3） 载体DNA必需带有标记基因,以便重组后进行重组子的筛选.
（4） 载体DNA必需是安全的,不会对受体细胞有害,或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去.
（5） 载体DNA分子大小应适合,以便提取和在体外进行操作,太大就不便操作.
实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件,都要进行人工改造后才能用于基因工程操作.
要先用限制内切酶处理目的基因和载体，使它们露出相同的粘性末端（基本上都是粘性末端，平末端较少），这样才能使目的基因和载体两者的末端很好的拼合在一起。否则接不上。
插？怎么插？
运载体多为质粒，是很稳定且牢固的环状DNA。
DNA分子就像梯子，梯子的扶手由磷酸二酯键构成，非常牢固，要限制性内切酶才能切开。
切开后质粒会出现两个粘性末端，所以必须用相同的内切酶切下目的基因，这样目的基因和
粘性末端才能接合。...
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插？怎么插？
运载体多为质粒，是很稳定且牢固的环状DNA。
DNA分子就像梯子，梯子的扶手由磷酸二酯键构成，非常牢固，要限制性内切酶才能切开。
切开后质粒会出现两个粘性末端，所以必须用相同的内切酶切下目的基因，这样目的基因和
粘性末端才能接合。
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