real-time PCR中内参基因的CT值做了几次real-time PCR ,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样的误差正常吗?如果

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/29 05:08:24
real-timePCR中内参基因的CT值做了几次real-timePCR,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样

real-time PCR中内参基因的CT值做了几次real-time PCR ,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样的误差正常吗?如果
real-time PCR中内参基因的CT值
做了几次real-time PCR ,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样的误差正常吗?如果不正常,会是什么原因造成的呢?
一直不太懂怎么看内参的值,是不是同一个细胞中的对照组和实验处理组的内参要一致才可以?我的都相差3-4个CT值,该如何校正?

real-time PCR中内参基因的CT值做了几次real-time PCR ,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样的误差正常吗?如果
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大(比如3-4个CT值)那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样量是一致的,那说明你的样本要么降解了,要么就是你的实验处理对内参的量产生了影响,必须换一个基因做内参.还有就是你的加样量误差很大.这样的话,建议你内参和目的基因在一个管子内做.各自选用不同的颜色标记的探针,不用CYBR Green.这样就没有任何加样误差了.
这个所谓的“校正”就是保持每个样本的加样量的一致.

请问real time PCR实验为什么要使用内参基因? real-time PCR中内参基因的CT值做了几次real-time PCR ,选的18s做内参基因,是直接购买的,所以没有问题,但是测得的CT值在对照组中和实验组中均有误差,相差约0.3左右,想请问这样的误差正常吗?如果 Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题 real time PCR看家基因的选择重要吗 关于real time PCR 引物设计的问题我想设计几个植物中基因的引物,然后进行real time PCR,引物设计有什么要求或是注意事项吗?有哪些设计技巧呢? real-time pcr 能测相同个体不同基因之间的的表达差异吗 real time PCR能测定基因组内某一基因的拷贝数吗 PCR,RT-PCR,GAPDH.real time之间的联系. 求助水稻的actin 内参基因引物想用水稻的内参做荧光定量PCR,有哪位大侠有水稻内参Actin的引物么?在下感激不尽! 定量PCR中,用内参基因进行标准化,为什么要用几何平均, 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因啊? 做RT-PCR内参的作用是什么?应该如何选择管家基因 RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些? real-time PCR 标准曲线请问real-time PCR 反应时,是否每一个基因都必须作一个标准曲线?不同的基因能在一块板上跑吗?(是否要考虑到不同的退火温度)为什么? 相对荧光定量PCR中,2(-ΔΔCt)是怎么回事?比如我用T基因为内参,得到了耐药菌A、B、C基因的Ct值的均值和敏感菌的A、B、C基因的Ct值的均值,怎么比较耐药株和敏感株这三个基因表达量有没有 real-time PCR 、quantitative RT-PCR 和absolute quantitative real-time PCR的区别这三种PCR的区别是什么,最好能详细点,第二个是quantitative real-time PCR,再补充一个real-time RT-PCR 在real-time PCR中如何检测DNA污染 如何设计real-time PCR 引物请问我想设计一个基因的引物,既能扩增人类也能扩增小鼠的该基因,该如何操作呢?