经过怎样处理才能从土壤中分离到链霉菌以外的放线菌
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 08:08:20
经过怎样处理才能从土壤中分离到链霉菌以外的放线菌
经过怎样处理才能从土壤中分离到链霉菌以外的放线菌
经过怎样处理才能从土壤中分离到链霉菌以外的放线菌
目的和要求
1、了解采集土样的要求和方法.
2、掌握由土壤中分离稀有放线菌的基本原理和操作技术.
3、学习并掌握土壤稀释法和微生物的纯培养技术.
4、学习并掌握抗生菌的鉴别方法.
二、原理
筛选放线菌是新抗研究的重要课题之一.迄今为止,已发现的抗生素有80%皆来自于放线菌.放线菌主要存在于土壤中,并在土壤中占有相当大的比例.一般地,放线菌在比较干燥、偏碱性、含有机质丰富的土壤中数量居多.通常,随着地理分布、植被及土壤性质的不同,放线菌的种类、数量和拮抗性也各不相同.土壤是微生物的大本营,其中的放线菌多以链霉菌为主,因此人们通常将除链霉菌以外的其它放线菌统称为稀有放线菌.若以常规方法进行分离,得到的几乎全部是链霉菌.然而,当采用加热处理土样、选用特殊培养基或添加某种抗生素等方法时,均可提高稀有放线菌的获得率.由土壤中分离放线菌的方法很多,其中包括稀释法、弹土法、混土法和喷土法等,本实验主要采用稀释法,并通过选用特殊培养基的方法,来获得少量稀有放线菌.
由土壤中分出的放线菌需进一步鉴别是否为需要的抗生菌.首先应根据筛选目的确定试验模型,然后利用培养基平板进行拮抗性测定.常用的方法有琼脂块法和滤纸片法.其主要依据是扩散原理,即观察在抗生菌周围是否会出现明显的抑菌圈.抑菌圈的大小和透明度则表明了该菌株抗菌活性的强弱.本实验选用了这两种方法.
三、实验材料
1、培养基：葡萄糖天门冬素琼脂,精氨酸琼脂,高氏1号琼脂,以上每种培养基皆用500ml三角瓶分装250ml.
2、灭菌物品：牛皮纸袋,培养皿,1ml、5ml吸管,250ml三角瓶分装90ml无菌水（含30粒玻璃珠）,18×180mm试管分装9ml无菌水,牙签,玻璃刮铲,18×180mm试管中分装10 ml 1‰K2Cr2O7母液.
3、试验菌：
（1）枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）
（2）大肠杆菌（Escherichia coli）
（3）金黄色葡萄球菌（Staphlococcus aureus）
（4）深红酵母（Ruodotorula rubra）
4、其它：采土铲,细目筛,药勺,称量纸,试管架,小天平,记号笔,打孔器,游标卡尺、镊子,圆滤纸片,15×150mm试管分装5ml无菌水,1ml吸管,无菌漏斗.