从链霉菌中分离某种基因的方法
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/15 02:00:28
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从链霉菌中分离某种基因的方法
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从链霉菌中分离某种基因的方法
首先你要知道这个基因的背景,如果这是个已知的基因,那么你需要调去这个基因的全编码序列,然后根据这个编码序列设计PCR引物,上游引物中应含有完整开放可读框的启动子,下游引物因含有完整开放可读框的终止子.接着,你需要提取链霉菌的基因组DNA,接着用基因组DNA作为模板,用之前设计的引物进行PCR扩增.当然,如果你这是个未知的基因,那么你需要纯化获得目标基因的蛋白质产物,然后进行蛋白质的肽链测序,N端测十个左右氨基酸残基,C端测十个左右氨基酸残基,然后去查相应的密码子编码表,接着设计不同的引物,再利用基因组DNA作为模板去扩增.这个方法其实现在已经基本不用了,现在的基因序列数据库是很强大的.而且链霉菌也已经完成了基因组测序,一般直接在NCBI上blast就能拿到目标基因的序列了,所以第一种方法就OK.
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