香菇及柄中提取多糖的方法
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/22 10:14:50
香菇及柄中提取多糖的方法
香菇及柄中提取多糖的方法
香菇及柄中提取多糖的方法
香菇多糖提取
原理：香菇多糖（lentinan;LTN）,是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分,经热水提取的香菇多糖可调节人休内有免疫功能的T细胞活性,可降低甲基胆蒽诱发肿瘤的能力.
香菇多糖
器材和药品
1.器材 ：
2.药品 ：市售香菇,
实验方法
1． 提取
将香菇洗净后除根部后切除根部,菌伞切成小块,放入真空干燥箱（低温）烘干,然后将烘干的香菇小块放在研钵里研磨.
用台秤量取香菇粉20g,置于250ml烧杯中,加入100ml蒸馏水,于石棉网上加热至沸,并不断搅拌,煮沸30min后,抽滤.滤渣再用100ml蒸馏水溶液煮沸30min,抽率.合并两次滤液,然后将合并后的滤液加热浓缩至20ml,溶于100ml95℅乙醇,搅拌并冷却至室温,静置1h.将混合液以4000r/min的转速离心10min,得到的沉淀放在真空干燥器中干燥,得到粗香菇多糖.
2.除蛋白
将得到的粗糖50ml100℃热水溶解,加Sevage 溶液 10ml,剧烈震动 10mim,静置10min,4000r/min离心10min,取上层清液,加Sevage 溶液反复操作5次
3.纯化
将提取的粗糖置于烧杯中,加蒸馏水50ml溶解,向溶液中加入等体积0.15mol/l的CTAB与硼酸-硼砂缓冲液处理,静置10min,4000r/min离心得沉淀用2mol/l乙酸溶解,静置10min,4000r/min离心后去上清液加等体积甲醇,静置24h.
（确定了DEAE脱色的最佳条件：缓冲液为pH6.0磷酸盐,流速为0.8mL/min,每6min收集一管.大蒜粗多糖去蛋白后经DEAE一52纤维素柱层析,选取一定洗脱峰范围进行多糖的收集,得到纯化大蒜中性多糖,用凝胶层析柱法对大蒜中性多糖的纯度进行鉴定,结果表明其为均多糖）