如何收集培养瓶里的贴壁细胞?用酶消化好吗?细胞要用来提蛋白或者RNA的.
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 13:18:29
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你说的不是很详细,首先你是想消化下来就体蛋白吗?如果是那你只能消化吧,如果采用超声波或者机械方式对你下一步实验不太好.
如果说你是过段时间再提取,那么用胰酶消化应该没问题
若果你的细胞贴的不牢,可以用力敲打也可以把细胞分散开
不能直接用消化酶,因为细胞之间的连接主要靠胶原蛋白酶,消化酶会杀死细胞,甚至分解其中物质。应该用胶原蛋白酶或者是胰蛋白酶
对,因为传代培养十代以内叫传代培养细胞,超过10代细胞生长大部分将停止有一部分继续生长到50代10~50代叫细胞株,超过50代的细胞核型才发生了突变 不
要是小瓶 先用PBS洗一遍 再用胰酶消化 大概半分钟 要看细胞是不是好消化 大概百分之七八十都变圆了 就可以吸出了 用含血清的培养液终止消化 把细胞吹下来 1000转 3min离心 倒掉上清,再用PBS把细胞悬起来 在离心一边 然后把PBS倒掉 放在-20冷冻就可以了
随时用随时拿就好了...
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要是小瓶 先用PBS洗一遍 再用胰酶消化 大概半分钟 要看细胞是不是好消化 大概百分之七八十都变圆了 就可以吸出了 用含血清的培养液终止消化 把细胞吹下来 1000转 3min离心 倒掉上清,再用PBS把细胞悬起来 在离心一边 然后把PBS倒掉 放在-20冷冻就可以了
随时用随时拿就好了
收起
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如何消化培养板里的细胞?拜托了各位 谢谢
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请教胰酶使用注意及贴壁细胞的消化 (补充时间:2010-01-08 22:14)最近培养贴壁细胞,在做流式凋亡时出现假阳性的结果,故请教一些关于胰酶使用和贴壁细胞消化方面的问题,
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