PCR的基本要素和扩增原理是什么?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/07/08 20:21:37
PCR的基本要素和扩增原理是什么?PCR的基本要素和扩增原理是什么?PCR的基本要素和扩增原理是什么?1.基本要素和扩增原理基本要素与DNA复制的基本要素是一致的.待拷贝的DNA称为模板,它可以是双链

PCR的基本要素和扩增原理是什么?
PCR的基本要素和扩增原理是什么?

PCR的基本要素和扩增原理是什么?
1.基本要素和扩增原理
基本要素与DNA复制的基本要素是一致的.待拷贝的 DNA 称为模板,它可以是双链 DNA 也可是单链DNA,最后扩增得到的产物是双链状态的.引物是 DNA 复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导 DNA 的合成.在 PCR 扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物.DNA 聚合酶是 DNA 复制的动力,在 dNTP 等底物存在时在引物的引导下沿着模板 DNA 合成互补的 DNA 链.
2.PCR 扩增的步骤
首先将模板 DNA 置于 92℃ -96℃,进行变性(denaturation)处理,使 dsDNA 在高温下解链成为 ssDNA ,且热变性不改变其化学性质;然后退火(annealing) ,将温度降至 37℃ -72℃,使引物与模板的互补区相结合;最后,在 72℃ 条件下,DNA 聚合酶将 dNTP 连续加到引物的 3'-OH 端,合成 DNA ,这个步骤称为延伸(extension).这三个热反应过程的重复称为一个循环,经过 20-40 个循环可扩增得到大量位于两条引物之间序列的 DNA 片段.图 5-1 所示是 PCR 反应前四轮示意图.