怎样做黑木耳菌种说的详细一点
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/08 22:50:43
怎样做黑木耳菌种说的详细一点
怎样做黑木耳菌种
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食 用 菌 制 种 技 术
江苏新沂市康原食用菌研究所 Tel:0516-88939450
(一)母种的制备 用试管制成斜面培养基,并接种原始试管种(保留种,并用于生产的母种即为生产母种,可用于扩接原种.
1．培养基配方 配方一 综合马铃薯培养基 马铃薯 200克 葡萄糖20克 磷酸氢二钾2克 硫酸镁0.5克 维生素B1 10毫克 琼脂20克 水1000毫升 PH值自然
配方二 合成培养基 马铃薯 20克 葡萄糖20克 磷酸二氢钾2克 蛋白胨10克 牛肉膏5克 酵母膏5克 硫酸镁0.8克 水1000毫升 PH值自然
2．培养基制作方法 先将马铃薯洗净去皮切成簿片,称取200克,加水1000毫升,煮沸15—20分钟,用4层纱布过滤,取其滤液并补足水至1000毫升,加入琼脂20克,再加热,琼脂溶化后,再加入其它配方中的药品.培养基的分装,应在培养凝固前进行（琼脂培养基40℃凝固）一般用漏斗,或分装瓶,下端连接一段软橡皮管,橡皮管下面再连接一水段玻璃管,在橡皮管上安装一个止水弹簧夹,分装时将玻璃管细口插入试管内,但不要碰到管壁,每支试管装入量为度管长度1/4.装好后塞上棉塞,每10支试管扎一捆,棉塞上用塑料纸封扎好,用线绳捆扎起来.
3．灭菌 将分装后的试管扎捆好,放入高压蒸气灭菌锅,在1.1kg/C㎡压力下(锅入温度达121℃)灭菌30分钟,使微生物包括芽孢全部杀死.待压力降到0度时,慢慢放出锅内气体,趁培养基没有凝固时,将试管摆成斜面.
4．接种、培养 通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上,置28℃、3天后将温度降至24℃继续培养,7—15天左右,菌丝长满整个试管斜面,即成(生产)母种.
(二)原种、制备 母种接种到原种培养基上,进行扩大繁殖育种即为原种,原种一般采用广口瓶或袋装.
1．培养基配方 配方一 木屑麸皮培养基 阔树木 78% 麸皮 20% 糖 1% 石膏粉 1% 水 65%
配方二 棉籽壳木屑培养基 棉籽壳 80% 木屑15% 糖 1% 麸皮 5% 过磷酸钙 3% 石膏粉 1%
2．拌料与装袋 选用新鲜无霉变原料,根据生产所需的数量,计算配料总量,将麸皮、石膏粉均匀的混合在培养料里,糖和过磷酸钙溶于水后,按上述干料量加入水,比例为1：1、3拌匀,培养料含水量60%为宜,含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜.堆闷30分钟后,装瓶(袋).用机械或人工装袋稍加压实,在袋口外套入塑料环,形成象瓶子一样,然后在袋口内塞松紧适宜棉塞、或用牛皮纸包扎好.
3．灭菌 原种灭菌方法有两种,高压灭菌和常压灭菌.高压灭菌又称加压蒸气灭菌,灭菌原理：在高温(121℃以上)、高压(1.1公斤/C㎡)条件下灭菌2~3小时,将芽孢在内的微生物全部杀死.常压灭菌称流通蒸气灭菌,由于灭菌设备、条件和基本因素的不同,温度变动在90~103℃之间,其热力、穿透力不强,在一定温度下维持足够时间达到灭菌目的,通常在100℃下维持10~12小时.
4．接种与培养 不论用接种箱或接种室接种,在接种前,需对接种箱或接种室用0、2%的来苏水或漂白粉进行消毒处理,然后将灭菌过的料瓶(袋)放在箱内,用烟雾剂密闭薰蒸消毒.接种室消毒,一间房需点燃3盒50克规格烟雾剂；接种箱消毒每次仅用重量为4克,一支母种试管可接4—6瓶(袋)原种.将接种后的菌种瓶(袋)放入发菌室培养.培养室温度22~26℃,相对湿度70%以下,发菌期间应保持良好的通风条件.原种从接种到菌丝长满瓶(袋)需30—40天.
(三)栽培种制备 原种进一步扩繁,即为栽培种.栽培种一般采用塑料袋制备,用无棉盖体封口.一瓶原种可接50-60瓶(袋)栽培种.栽培种培养基配方及拌料、装袋、灭菌、接种、发菌管理与原种相同.