RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/25 20:00:20
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RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了
RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了

RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了
补充:RNA提取出问题也可能PCR不到目的条带

这个,你可以设一下阳性对照排除一下是不是条件的问题,有时候pcr仪不好也会有问题。
如果再没有,条带长可以试试换换高保真酶,GC含量高试试GCbuffer,不用taq酶自带的。
楼下说的对,最坏的可能是RNA没提出来,这也是常见情况。

反转录pcr的话最好你找一下反转录没的问题
荧光定量pcr的话说明你标准曲线设定的太低

RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了 PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 普通PCR 为什么只有引物二聚体没有目的条带? RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u PCR产物问题如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~marker是DL2000而第二次是高保真酶跑出来的电泳图,没有我的目的产物,只有很多二聚体这是为什么呢?我用的引物都是一样的~2次PCR pcr产物的问题~高手进如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~~~marker是DL2000而第二张是高保真酶跑出来的电泳图,没有我的目的产物,只有很多二聚体这是为什么呢?我用的引物都是一 关于PCR的问题:PCR如果目的基因扩增出来了是不是条带中的引物二聚体就没有了呀? 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? PCR之后电泳没有条带,连引物二聚体都没有?这是怎么回事了?PCR一直都没出现过引物二聚体,引物二聚体是在溴芬兰的前面么? RT-PCR 刚刚换了新的mmlv和RRI,其他的oligodt,dntp,taq,引物等试剂都至少半年了.没换新试剂之前做了几次,每次都是marker很清楚,目的条带和内参都没有,每个通道只在100bp位置有条带,就认为是二聚体 小鼠基因型鉴定 没有目的条带和内参 只有引物二聚体我做的是小鼠基因型鉴定,采用的是25nM NaoH/0.2mMEDTA 40mM Tris HCl PCR 基因组DNA模板测定 显示DNA含量0.997ug/ul 但OD260/OD280=1.1 做PCR的时候没有目 PCR扩增1829BP的片段,一对引物的Tm都是64度,退火温度已经试过55和50度都没有目的条带,请教pcr设置参数在55和50度只看到引物二聚体且有拖尾现象,没有目的条带 反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,这是为什么呢?Oligo(dT)反转录,目的片段2700bp,引物二聚体小于100bp pcr如果只有引物二聚体时应该怎样调整 为什么用srap引物跑PCR只有一条带我的模板是火龙果的DNA,模板的质量是过的去的,进行其他扩增是可以的.但是用SRAP引物就不正常了.扩增程序应该没有问题,因为PCR结果可以看到有引物二聚体的 为什么用srap引物跑PCR只有一条带?我的模板是火龙果的DNA,模板的质量是过的去的,进行其他扩增是可以的.但是用SRAP引物就不正常了.扩增程序应该没有问题,因为PCR结果可以看到有引物二聚体 特异引物PCR问题各位大牛,小弟初涉分子生物实验,最近在用设计好的特异性引物扩增保守序列,可是总也是扩增不出来,常常是只有引物二聚体,没有任何扩增条带,我也试着在引物报告单上所给