我要扩增一个基因GC含量较高,我想用GC buffer试试 现在用的是master mix 酶,buffer是否能与master mix 酶同用?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/19 13:28:47
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我要扩增一个基因GC含量较高,我想用GC buffer试试 现在用的是master mix 酶,buffer是否能与master mix 酶同用?
我要扩增一个基因GC含量较高,我想用GC buffer试试
现在用的是master mix 酶,buffer是否能与master mix 酶同用?

我要扩增一个基因GC含量较高,我想用GC buffer试试 现在用的是master mix 酶,buffer是否能与master mix 酶同用?
我没做过这个,给点自己知道的信息,不知道能不能帮上:)mix应该是由buffer、酶、dNTP和镁离子(、水)吧?你要是要加这个GC buffer就是有两份buffer,如果总体积不变的话,可能最大的问题是缓冲液中各离子浓度的问题.我不知道mix里的buffer以及GC buffer的成分是什么样的,如果大多数成分相同,就可能会导致缓冲液浓度过高,如果两者完全不同的话,或许还能做这个实验.假如反应体系总体积变化的话,热动力学又会完全不同,而且还要调整这两者的用量.
我觉得最好是单独使用GC buffer、酶、dNTP和镁离子,然后略提高退火温度、略延长解链时间(但不能太长,否则酶的活力会降低).

我要扩增一个基因GC含量较高,我想用GC buffer试试 现在用的是master mix 酶,buffer是否能与master mix 酶同用? PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终 PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增.设计一个引物,下游设计一个引物,上下游引物间想穿插(包含一定共同片段),这样成吗. 如何分析基因序列GC含量.想要知道某序列的GC含量,要如何操作?是用什么软件,还是在哪个网站上? 请问对于GC含量较高的片段怎么才能测通 什么原因造成GC含量高 gc含量高pcr应该怎么扩 gc含量高pcr应该怎么扩 gc 在DGGE实验中,胶回收后要测序前的PCR扩增时引物必须为不带GC夹子的吗?我用带GC夹子在DGGE实验中,胶回收后要测序前的PCR扩增时引物必须为不带GC夹子的吗?我用带GC夹子的扩增了,有三个条 用MEGA 如何计算GC含量 GC是什么,为什么要GC 请问对于GC含量较高的片段来说,有什么好的方法能测通吗,就差100pb左右. 高GC基因的荧光定量该怎么做 有没有专门做高GC的SYBR染料啊,我那基因只能用GC Buffer II 才能P出来 为什么说gc含量高的dna变性温度高 要扩增3000左右的目的片段,但是设计的上下游引物的GC含量差异很大,如何是好?急求……即起始密码子之后和终止密码子之前的部分,GC差异很大…… 高GC基因的荧光定量能不能加DMSO 小麦种GC含量高,说明了什么?