如何设计带flag标签的引物

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 09:14:18
如何设计带flag标签的引物如何设计带flag标签的引物如何设计带flag标签的引物1、aasequenceofFLAGtag:dykddddk(你可以查商品化质粒带的FLagtag确认一下).2、核

如何设计带flag标签的引物
如何设计带flag标签的引物

如何设计带flag标签的引物
1、aa sequence of FLAG tag:dykddddk (你可以查商品化质粒带的FLag tag确认一下).
2、 核酸序列参考:gattacaaggacgatgacgataag(我通过Vector NTI backtanslate得到序列,然后做了些修改,具体分别用gat/gac错开连续的ASP氨基酸,避免在PCR时发生错配),在酵母中表达没问题,能被FLag抗体 M2识别.
3、引物设计参考:5’ flag核酸序列--目的基因序列--3',如果引物太长,可以考虑做两轮PCR(我做的是2轮PCR,所以有2中提到的避免错配设计).
4、可以按照你设计的顺序克隆,不需要去掉ATG,翻译从第一个ATG开始,后面的ATG翻译为Met.