求教关于dna解旋酶的问题我们说解旋酶作用于氢键,但是氢键的断裂不属于化学反应,所以解旋酶并没有催化化学反应,这就和酶的定义矛盾了.上面所说的,应该没有错误,那么究竟是什么原因?请
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 10:44:48
求教关于dna解旋酶的问题我们说解旋酶作用于氢键,但是氢键的断裂不属于化学反应,所以解旋酶并没有催化化学反应,这就和酶的定义矛盾了.上面所说的,应该没有错误,那么究竟是什么原因?请
求教关于dna解旋酶的问题
我们说解旋酶作用于氢键,但是氢键的断裂不属于化学反应,所以解旋酶并没有催化化学反应,这就和酶的定义矛盾了.上面所说的,应该没有错误,那么究竟是什么原因?请专家赐教.同时,如果能详细阐述解旋酶的机理,将不胜感激.
求教关于dna解旋酶的问题我们说解旋酶作用于氢键,但是氢键的断裂不属于化学反应,所以解旋酶并没有催化化学反应,这就和酶的定义矛盾了.上面所说的,应该没有错误,那么究竟是什么原因?请
氢键断开确实不属于化学反应,可是你忽略了解旋酶的另一个属性:ATP水解酶,它依靠催化ATP分解来提供DNA解旋的动力,它的“酶”性实际上是源于这里.
至于机理,很抱歉这个至今还不清楚,最近Cell杂志还刊登了研究其机制的文章.
整体上把DNA双链看做一个完整的整体,解旋酶催化作用于DNA双链的分离,其过程不像高温加热那样,使DNA解旋那么简单。其中包括一系列复杂的化学变化
我举一个例子
疯牛病听说过吧
疯牛病病毒在生物学中被成为软病毒
因为它只由蛋白质构成
其本质为一种错误折叠的蛋白质分子
它的作用机理:
因为是一种错误折叠的蛋白质分子
当它与正常的蛋白质分子相遇时
会使得正常的蛋白质分子向错误折叠的方向变形
致使正常的蛋白质分子变构失活
成为错误折叠的蛋白质分子
在此过程中
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我举一个例子
疯牛病听说过吧
疯牛病病毒在生物学中被成为软病毒
因为它只由蛋白质构成
其本质为一种错误折叠的蛋白质分子
它的作用机理:
因为是一种错误折叠的蛋白质分子
当它与正常的蛋白质分子相遇时
会使得正常的蛋白质分子向错误折叠的方向变形
致使正常的蛋白质分子变构失活
成为错误折叠的蛋白质分子
在此过程中
疯牛病病毒本身理化性质不变
质量不减
催化了由正常蛋白质到错误蛋白质的变化过程
它符合酶的所有性质
是不是可以称作一种酶
在此过程中
蛋白质的变构不涉及一级结构的变化
即没有化学键的断裂和形成
我们身体里也存在类似效应的酶
由多肽链到蛋白质的过程中
酶是不可或缺的
某些需要有甲基化,糖基化的过程
某些只需要多肽链的折叠
那么第二种
没有化学键的断裂和形成
另外
酶在体内发挥完催化作用后
就会立即被灭活
灭活要酶的参与
灭活的两种方式
一是酶解掉,二是变构失活
第二种方式
只要不涉及到酶的一级结构变化
那就没有化学键的断裂和形成
这说明什么呢
生物中所说的化学变化已经不是化学中所说的化学变化
就比如
一条氨基酸长链
在没有折叠前是没有催化活性的肽链
折叠后是有相应功能的蛋白质
在化学的角度上看
前后是一种物质
而生物中却给了它们不同的命名
说明在这个过程中
从生物的角度看是发生了化学反应的
也就是说
从生物的角度看
解旋酶也是催化了化学反应的
与酶的定义没有矛盾
(不过解旋酶的机理我不知道,讲了这么多最后还是理论,没有办法从根本上解释这个问题。期待别的高手ing······)
收起
介就是PCR技术
[概述]
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。
DNA聚合酶(DNA polymerase I)最早于1955年发现,而较具有实验价值及实用性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr...
全部展开
介就是PCR技术
[概述]
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。
DNA聚合酶(DNA polymerase I)最早于1955年发现,而较具有实验价值及实用性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H. Klenow 所发现,但由于此酶不耐高温,高温能使之变性, 因此不符合使用高温变性的聚合酶链式反应。现今所使用的酶(简称Taq polymerase), 则是于1976年从温泉中的细菌(Thermus aquaticus)分离出来的。它的特性就在于能耐高温,是一个很理想的酶,但它被广泛运用则于80年代之后。PCR最初的原始雏形概念是类似基因修复复制,它是于1971年由 Dr. Kjell Kleppe 提出。他发表了第一个单纯且短暂性基因复制(类似PCR前两个周期反应)的实验。而现今所发展出来的PCR则于1983由 Dr. Kary B. Mullis发展出的,Dr. Mullis当年服务于PE公司,因此PE公司在PCR界有着特殊的地位。Dr. Mullis 并于1985年与Saiki 等人正式发表了第一篇相关的论文。此后,PCR的运用一日千里,相关的论文发表质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背。随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广泛应用,成为分子生物学研究的最重要技术。Mullis也因此获得了1993年诺贝尔化学奖。
〔PCR原理〕
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。
发现耐热DNA聚合酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
PCR反应特点〕
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(μg=-6)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。
简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等DNA扩增检测。
(我自己不太懂,你看看吧,也许有用)
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说PCR的那个人说的是废话
您想问题还真是深入呢。 其实解旋酶是利用ATP水解来提供必备的能量。 每解开一个碱基对需要消耗一个ATP。其机理目前没有完全研究透彻,但已经有模型! 机理如图: