启动子PCR拟南芥耐盐基因启动子克隆PCR,用pfu酶,TM值为49,用49,51,53都扩不出来,有何原因?

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2025/01/22 22:46:02

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启动子PCR
拟南芥耐盐基因启动子克隆PCR,用pfu酶,TM值为49,用49,51,53都扩不出来,有何原因?

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1 按照教科书上的要求,PCR的退火温度应该为TM-5度,不过有时稍高点也可以,不过你得温度明显过高!试试降低温度.
引物的TM 值太低了,最好重新设计引物,将TM值稍微高点,不然在以genome这样的复杂模板中很易非特异扩增.
2 可能你扩的片段过长,可以用重组PCR,先分成两段扩,再变性后放在一起退火,再扩一轮!

启动子PCR拟南芥耐盐基因启动子克隆PCR,用pfu酶,TM值为49,用49,51,53都扩不出来,有何原因? 基因克隆和启动子克隆是一回事么利用LM-PCR获得启动子用连接介导PCR克隆启动子,如何保证开始的限制酶切片段中就包含启动子序列? 基因是否含启动子已知一段基因片段,如何克隆之前的片段,也就是如何克隆已知基因的启动子?启动子一般有多少BP? 启动子是不是基因?启动子属不属于基因? 基因启动子的GUS分析启动子是否有基因产物 TaKaRa LA PCR in vitro Cloning Kit试剂盒克隆启动子,一样的困扰.联系我：[email protected] 基因载体复制原点与启动子区别急求生化基因表达启动子序列目的基因中含不含启动子和终止子功能基因全序列包括启动子吗? 用PCR技术合成目的基因是的引物只能是一条模板一个引物吗还是可以多个?还有启动子和终止子,一个,还有启动子和终止子,一个目的基因是有固定的启动子终止子还是共用的启动子终止子启动子清除, 有两个启动子的TA克隆载体吗启动子算是编码区基因吗?启动子也能翻译成氨基酸啊！生物中基因表达载体中启动子的化学成分启动子的化学成分.