求!博凌科为 的 Pfu DNA Polymerase(含10×Taq Buffer,Mg2+)怎么样啊?急!

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/15 07:51:38
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博凌科为 的 Pfu DNA Polymerase(含10×Taq Buffer,Mg2+). 超纯高保真耐热DNA 聚合酶
Pfu DNA Polymerase 是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Polymerase 基因的大肠杆菌中表达并经多次过柱纯化分离出来的.由于Pfu 有3’-5’的外切酶活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错误, 而传统的Taq DNA Polymerase却不能. 其它高温DNA Polymerase 如:Vent,Deep Vent,Tli,UITma 等虽具有校正功能,但Pfu 是目前已发现的所有耐高温DNA Polymerase中出错率最低的.Pfu DNA聚合酶比普通Taq DNA 聚合酶热稳定性更好,95℃1 小时仍保持90%以上活性.
适用范围
用于DNA 的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析(SNP)和末端补平等.
活性定义
1 单位(U) Pfu DNA Polymerase 活力定义为在74℃、30 分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/ 引物,将10 nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量.
质量控制检测
SDS-PAGE 检测纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变.
主要技术参数
有3’-5’外切核酸酶活性,无5’-3’外切核酸酶活性,DNA 扩增时延伸速度低于Taq酶,一般情况下Pfu酶的延伸速度为每分钟0.5-1 kb.Pfu 酶的热稳定性比Taq 酶好,对于GC 含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃,对Pfu 酶的活性无影响.其PCR产物为平端,可加A处理再与TA载体连接或使用平末端克隆载体.
保存条件: -20℃保存