【求助】有关细胞划痕法操作中不明白的我做的是大鼠血管平滑肌细胞的迁移能力测定给予不同浓度高糖刺激,并给予不同浓度药物干预后观察这是网上搜到的流程:先用marker笔在6孔板背后

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/15 23:37:27
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【求助】有关细胞划痕法操作中不明白的
我做的是大鼠血管平滑肌细胞的迁移能力测定
给予不同浓度高糖刺激,并给予不同浓度药物干预后观察
这是网上搜到的流程:
先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
放入37度5%co2培养箱,培养。按0,12,24小时取样,拍照。
我的问题是:
司徒镇强的细胞培养书中细胞划痕的具体操作是:包被基底膜-水化基底膜-制备单层细胞-人工划痕-测量迁移率,但是我看到的网上的资料同上,没有制备基底膜这步,所以,是不是不用制备基底膜?
2.上面第4步中PBS清洗后是不是可以直接加条件培养基?
3结果能不能数4个不同象限迁移的细胞数来判断迁移能力?
希望做过这个实验的朋友帮忙解答下,
还有就是到了第三步,用枪头划之前需要把培养液倒掉吗?还是划完后再倒掉旧的培养液换成条件培养基?

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1、不需要制备基底膜了.
2、最好用无血清培养基洗涤细胞
3、可以用迁移的细胞数来说明细胞迁移能力
4、划痕以后需要洗涤细胞,然后加入条件培养基.

【求助】有关细胞划痕法操作中不明白的我做的是大鼠血管平滑肌细胞的迁移能力测定给予不同浓度高糖刺激,并给予不同浓度药物干预后观察这是网上搜到的流程:先用marker笔在6孔板背后 关于细胞划痕实验的分析问题,最近做细胞划痕实验,不知道怎么分析有无意义,还有看文献看别人测量的划痕宽度是用xx+-yy的形式标记的,加减后面的yy是怎么计算的呢,我在网上用的工具直接就 [紧急求助]植物细胞的胞间连丝与哪些结构有关? [紧急求助]植物细胞的胞间连丝与哪些结构有关? 我的车玻璃有划痕怎么办 滤纸片法转移操作步骤我最近做这方面的试验,从来没做过,细胞克隆后,需要转移扩大培养,希望得到答复! 请教消化法细胞传代培养的操作步骤,刚开始做, 为什么癌变与细胞中遗传信息的改变有关?我觉得细胞中遗传信息没变啊~ 求助啊!我真的不会做! 【求助】请问有Dmso做溶剂的反应,后处理怎么操作? 慢病毒转染系统和逆转录病毒转染系统在转染T细胞的过程中操作有什么不同?有什么注意事项啊?为什么我做的转染效率连5%都达不到? 有关化学的操作 我的眼镜的树脂镜片的划痕怎么去除 怎样去除不锈钢表面的划痕我新买的一块手表是不锈钢的表面,没用几天就有了划痕,请问怎样才能去除这些划痕? 用血球计数器计算细胞数量,其误差与哪几方面的操作有关? 像生物中说细胞外液的渗透压高.指的是细胞内液失水还是外液失水我老是不明白细胞内外渗透压高低的作用细胞外液的渗透压高是指外液的浓度大吗 下列有关实验操作的叙述正确的是( )下列有关实验操作的叙述正确的是(  )A.观察植物细胞有丝分裂的实验中,解离的目的是使细胞相互分散开B.甲基绿和吡罗红与斐林试剂使用方法类似,均为 克隆出的后代与供体的遗传物质和表现性一样这句话我知道错了 但是我不明白是哪里错了 第一种情况是 表现性错了 与环境有关,第二种说法是受体是卵母细胞 中有细胞质细胞质中也有遗传