双缩脲反应
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/31 22:07:27
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双缩脲法的原理双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2)在碱性溶液中可与铜离子产生紫红色的络合物,这一反应称为双缩脲反应.因为蛋白质中有多个肽键,也能与铜离子发生双缩脲反应,且颜色深浅与蛋白质的含量的关系在一定范围内符合比尔定律,而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关,所以可用双缩脲法测定蛋白质的含量.
双缩脲反应主要涉及肽键,因此受蛋白质特异性影响较小.且使用试剂价廉易得,操作简便,可测定的范围为1～10Mg蛋白质,适于精度要求不太高的蛋白质含量的测定,能测出的蛋白质含量须在约05Mg以上.双缩脲法的缺点是灵敏度差、所需样品量大.干扰此测定的物质包括在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀.
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