酿酒酵母是怎样培出来的?主要是制作果酒的酵母,

酿酒酵母是怎样培出来的?主要是制作果酒的酵母,
酿酒酵母是怎样培出来的?
主要是制作果酒的酵母,

酿酒酵母是怎样培出来的?主要是制作果酒的酵母,
如果你有菌种,则只需相应的酵母培养基和合适的培养温度,经过2-3天就可培养好.如果没有菌种则需要分离与纯化所需菌种,这个过程比较麻烦.

酵母菌的分离纯化
一、实验原理 酵母菌常见于含糖份比较高的环境中，如果园土果皮等的表面。多数酵母菌喜欢偏酸条件，最适pH为4.5-6.0.酵母菌生长迅速，容易分离培养。在液体培养基中，酵母菌比霉菌生长快，利用酸性条件则可以抑制细菌的生长。因此常用酸性液体培养基获得酵母菌的加富培养，然后在固体培养基上划线分离纯化。
二、器材和用品 1、苹果皮、葡萄皮、果园土等。
...

全部展开

酵母菌的分离纯化
一、实验原理 酵母菌常见于含糖份比较高的环境中，如果园土果皮等的表面。多数酵母菌喜欢偏酸条件，最适pH为4.5-6.0.酵母菌生长迅速，容易分离培养。在液体培养基中，酵母菌比霉菌生长快，利用酸性条件则可以抑制细菌的生长。因此常用酸性液体培养基获得酵母菌的加富培养，然后在固体培养基上划线分离纯化。
二、器材和用品 1、苹果皮、葡萄皮、果园土等。
2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基：
3、无菌吸管、无菌培养皿、100ml无菌水1瓶/组、涂棒、美兰染液、显微镜、接种环等。
三、实验方法
1、接种：取果皮（不需冲洗）或土壤5克，加入到100ml无菌水中，充分搅拌后，用无菌吸管取1ml接入到9ml乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，在28-30℃培养箱中培养24h，可见培养液变浑浊。
2、加富培养：用无菌吸管取上述培养液1ml，注入另1管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，在28-30℃培养箱中培养24h。
3、镜检：用无菌操作法用接种环取少量菌液置于载玻片上，中央滴一滴美兰染液，混合均匀后制成水浸片，在高倍镜下观察酵母菌的形态及出芽方，并可根据菌体是否.染色来区分酵母菌的死活细胞，因活细胞使美兰染液液还原，故菌体不着色.,
4、涂皿：用马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶化后制成平板，用无菌吸管取0.1ml加富培养液到平板中，用涂棒涂匀后培养24h。
5、分离纯化：用接种环挑取单个酵母菌菌落，在平板上四区划线，培养后分离得到单个菌落。
6、镜检：挑取单菌落，制片观察其形态。
7、菌种保藏：接种酵母菌到马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基上，长出菌苔后冰箱保藏
培养基制备
(一)YPD培养基 YPD 或YPED，又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YPD）琼脂培养基 用于酵母菌的培养
配方：1% Yeast Extract（酵母膏） ，2% Peptone（蛋白胨） ，2% Dextrose (glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉
配制方法： 1 溶解10gYeast Extract（酵母膏）, 20gPeptone（蛋白胨）于900ml水中，如制平板加入20g琼脂粉 2 高压 121度 20min 3 加入100ml 10×Dextrose (glucose)（葡萄糖），(葡糖糖溶液灭菌后加入)
（二)马铃薯葡萄糖培养基的配制
1、培养基成分
马铃薯 20g
葡萄糖 2 g
琼脂 1.5-2g
水 100ml
自然pH
2．配制方法
(1)配制20％马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000m1。80℃浸泡lh，用纱布过滤，然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20％马铃薯浸汁，贮存备用。
（2)配制时，按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水。
(3)分装、加塞、包扎。
(4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 m

收起