如何检测cDNA我做RT-PCR想在PCR之前检测下我的cDNA看下逆转录有没有问题,请问高手如何检测,跑电泳可以吗,那么电泳条带应该是怎么样算是比较好的?

来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 00:39:03
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如何检测cDNA我做RT-PCR想在PCR之前检测下我的cDNA看下逆转录有没有问题,请问高手如何检测,跑电泳可以吗,那么电泳条带应该是怎么样算是比较好的?
如何检测cDNA
我做RT-PCR想在PCR之前检测下我的cDNA看下逆转录有没有问题,请问高手如何检测,跑电泳可以吗,那么电泳条带应该是怎么样算是比较好的?

如何检测cDNA我做RT-PCR想在PCR之前检测下我的cDNA看下逆转录有没有问题,请问高手如何检测,跑电泳可以吗,那么电泳条带应该是怎么样算是比较好的?
cDNA一般是不检测的,并且也不好检测,因为你的cDNA都是mRNA,电泳出来会是一条弥散的带.并且上样量需要较大才能看间.
需要检测的是提取的RNA,看是否28s和18s rRNA是否清晰、明显(二者位置分别在5kb和2kb处).最大rRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0倍,否则表示RNA样品的降解.出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解.
如果RNA抽提没有问题,那么RT产生的cDNA一般来说是不会出现问题的.

一般都可以用电泳检测是否合成适当大小片段的带,如果你是想看它的大小肯定可以,如果想看他碱基有没有出错当然还是测序或者使用探针检测,就是比较麻烦

如何检测cDNA我做RT-PCR想在PCR之前检测下我的cDNA看下逆转录有没有问题,请问高手如何检测,跑电泳可以吗,那么电泳条带应该是怎么样算是比较好的? 纯化的双链cDNA要比单链的cDNA更容易做RT-PCR吧?如题,因为要P一段大约5-6kb的cdna片段,我在想合成cDNA的第二条链,然后纯化,这样应该更好P一些吧?求问大虾? RT-PCR 法对mRNA表达检测反转录过后如何定量cDNA,可以用核酸浓度测定仪吗 定量RT-PCR在哪一步定量是定RNA 的量还是定cDNA的量?16sRNA的对照如何做? 反转录获得cDNA后,为什么还要做RT-PCR? Rt-pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带RT-PCR扩增得到的cDNA是什么原因使其在跑电泳之后不出现cDNA条带? 请问,我反转录时设置了2个循环,cdna还可以做半定量PCR吗?Actin的pcr在500bp单一条带. 我在做实时荧光定量PCR~为什么做样的时候要加入两样东西(反转录后的cDNA和质粒) 我只做过RNA提取,cDNA合成,荧光定量pcr,能从事什么工作? 目的mRNA如何检测想看看目的基因转录的mRNA有多少,要做RT-PCR怎么看呢刚开始接触不太明白,PCR不是扩增DNA吗那mRNA怎看呢 最近在做实验RT-PCR,我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀 PCR实验中加cDNA模板量是否要一致?我的3个样本在逆转录成cDNA后测浓度发现,样本1浓度是599ng/ul,样本2为1000左右,样本3为1290,1.在做PCR时,加入的cDNA体积是不是应该根据浓度调整为,样本1 想获得完整的cds序列,需要通过反转mRNA获得的cDNA里面,PCR出我想要的某个基因的cds的完整序列。是否可以在utr区设计引物?还是必须做RACE? 做PCR扩增产物是270bp,用什么样的Marker?我刚开始学做PCR,所以不清楚,请前辈们赐教了~不好意思啊!关于实验我知道的比较少,也没有师兄师姐带,所以就~我做RT-PCR,逆转录产物是cDNA,扩增以 pcr检测需要多长时间我在医院化验乙肝两对半是25 医生说是让做PCR检测,请问那个需要多长时间结果能出来。 您好!我需要从cDNA调取一段基因,引物已经设计好,在PCR过程中不知如何调整体系,P不出目的条带?您好!我需要从cDNA调取一段基因,引物已经设计好,在PCR过程中不知如何调整体系,P不出目的条带? cDNA能存放多久?以RNA为模版转录出的cDNA,4摄氏度下能存放多久?已经存放了一星期,在用来做PCR会不会有影响 再问:做基因克隆为什么要提dna我做苯丙氨酸解氨酶基因的克隆,老师怎么让我提DNA,提RNA不就可以了么,提出RNA,设计引物,然后RT- PCR,得到第一条cDNA链,然后扩增,得到cDNA,接着导入质粒,转化菌株