纯化后的蛋白在含有高浓度nacl的情况下浓缩容易沉淀吗

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/11/24 16:08:29

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纯化后的蛋白在含有高浓度nacl的情况下浓缩容易沉淀吗
理由相信,浓度越高,对保存蛋白质越有利.加入 PEG 和更换缓冲液种类是一种值得试验的方法,但结果如何还在两可之间,没试过就不会知道.
镍柱下来以后,溶液中混有相当多咪唑和议定含量的Ni,都有可能引起蛋白质不稳定变性沉淀.
我在纯化一种蛋白质时,也遇到过相同的情况,虽然蛋白质不同,但是也许能有帮助.
镍柱后,用含 EDTA 的缓冲液透析,除去 Ni ,再过 DEAE 离子交换柱,之后透析再浓缩,分装小管,-80度保存.一次使用一支.
理论上说蛋白质应在高浓度情况下保存,但当缓冲溶液中含有大量盐而且目的蛋白中含有大量输水氨基酸的情况下,高浓度就不利于保存.
在这种情况下,如果你不想太多的稀释蛋白,可以选择适当脱盐,如透析、凝胶过滤、超滤等,但应保持缓冲液具有一定的离子强度（500mM NaCl这个浓度太高,可以降到100）,如果还不行的话,可以添加甘油至终浓度5%左右.
Ni纯化最好不要用Tris,可能会影响Ni的结合.

纯化后的蛋白在含有高浓度nacl的情况下浓缩容易沉淀吗纯化蛋白的保存请问纯化后的蛋白在4度放置了半个月,其蛋白含量会不会明显降低? 用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,Elution buffer中含有500mM的咪唑,可以直接测蛋白浓度吗? 有一纯化已知蛋白溶液,怎样测定其中蛋白的浓度? 蛋白与药物反应后怎么进行纯化纯化后怎么确定最后的蛋白含量和药物含量我纯化的蛋白总是有沉淀,该怎么办已经改过盐浓度,沉淀还是在啊可溶性表达的蛋白如何纯化?纯化后如何除咪唑? 经初步纯化后的蛋白质样品,如果用层析法检测显示只有一个峰,是否可以认为该纯化样品只含有一种蛋白?这两道题一个问法,就是略有区别在所用的层析法.具体题目如下：1,经初步纯化后的蛋培养基中含有高浓度NaCl有助于金黄色葡萄球菌的筛选.这部分知识点在生物书的哪里? 在纯化蛋白时,如何重复使用柱子及柱料?用his柱纯化的在纯化蛋白时,镍离子有什么作用?用His柱纯化的做蛋白电泳时,在不知道蛋白样品分子量的情况下如何选择分离胶的浓度有没有方法可以快速测定样品中的蛋白浓度? 教各位大侠,在蛋白纯化时,MBP-目的蛋白融合蛋白在变性之后还能结合上MBP抗体的beads吗?因为我的菌液浓度很高,所以超声波打了30次才完全澄清,但因为打超声波的次数太多,不知道我的MBP-目的用NaCl盐溶液进行蛋白质的分离纯化时浓度多少为宜纯化水系统中在什么情况下才更换精密过滤器的的滤芯呢? 求教离子交换柱纯化蛋白的问题为什么用带HIS标签的镍柱纯化试剂盒纯化蛋白后包ELISA可以避免大肠杆菌的干扰组氨酸标签纯化蛋白挂不上柱子,蛋白的量还挺高的