PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/25 23:45:30
PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.
PCR为什么要在冰上操作?
做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.
PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复.
这些个材料都容易变质,taq要失活,引物会降解,模板会断裂……所以要保持低温,而且用完要马上放回-20℃冰箱保存.
taq酶是耐高温的DNA聚合酶~
酶活在低温时几乎不显现但不至失活~放到PCR仪里时又能继续表现高活力
在冰盒上操作是防止反应底物提前在室温下发生反应~
操作时还有注意，尽量不用手去接触小管底部，而是轻拿靠近管口处，因为手上的温度可是够高的哟~...
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taq酶是耐高温的DNA聚合酶~
酶活在低温时几乎不显现但不至失活~放到PCR仪里时又能继续表现高活力
在冰盒上操作是防止反应底物提前在室温下发生反应~
操作时还有注意，尽量不用手去接触小管底部，而是轻拿靠近管口处，因为手上的温度可是够高的哟~
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因为这些都很容易失活的，还有要注意引物和dNTP不要反复冻融，也容易失活的
保证酶活,核酸物质稳定.
以上说的不够全面。
这个叫冷启动，第一怕TAQ酶降低活性，第二为更好的首轮解链，提高最终的特异性。
tritton的穿透力太强，温度底的时候可以防止质粒污染过度。
tap酶在低温时降低反应和代谢，延长时间。促使反应稳步不燥的进行。
在冰上可以保持各种酶及底物不失活，同时也使得酶的活性很低
对于PCR的taq酶以及分子生物学中很多酶而言，在室温下是有活性的，若在室温下操作，你在东西未加好之前就已经有副反应进行了，这不利于实验
实际上，很多时候也没这么严格，PCR如果样品不多，完全可以在室温下操作...
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在冰上可以保持各种酶及底物不失活，同时也使得酶的活性很低
对于PCR的taq酶以及分子生物学中很多酶而言，在室温下是有活性的，若在室温下操作，你在东西未加好之前就已经有副反应进行了，这不利于实验
实际上，很多时候也没这么严格，PCR如果样品不多，完全可以在室温下操作
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