sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.主要是我看分离胶里没有蛋白,我就
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/19 10:15:48
sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.主要是我看分离胶里没有蛋白,我就
sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?
跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.
主要是我看分离胶里没有蛋白,我就想会不会在浓缩胶里。所以给浓缩胶也一起染色的。上样缓冲液用的是2倍的买的蛋白marker上说明书上说的那个配方。用的就是20UL蛋白提取液20ul的上样缓冲液。
sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.主要是我看分离胶里没有蛋白,我就
首先,我建议你到丁香园或者说中国生命科学论坛发帖求助,能更快得到答案.
其次,你的问题说的不太清楚.譬如说你测得的蛋白浓度是多少呢?你有跟BSA标准曲线比对一下么?会不会是蛋白浓度太低需要浓缩呢?也有可能说你的分离胶和浓缩胶的浓度不适合你的蛋白.另外你跑的是什么蛋白呢?是比较纯的蛋白还是全蛋白呢?如果说全蛋白的话没有条带,又有可能是你样品处理的问题了.有可能的话发张图上来帮你看看.
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能否说下你的蛋白样品是如何处理的?是用什么办法提取的蛋白?
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看了楼下说的,我觉得你说的确实有问题,按说浓缩胶里是不会有蛋白条带的,我染色也从来都是把浓缩胶去掉的.应该是染色分离胶啊.看了你提取蛋白的步骤,我觉得也没有什么问题吧,你样品是怎么处理之后点样的?加1/4体积的5倍loading buffer么?
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实在是看不出来问题所在.有空把你的图发到我邮箱 我想看看你的图.
[email protected]
样品里面压根就没有蛋白质呗
可能蛋白太浓了,一煮都沉淀了。
浓缩胶里当然没有条带了 ,条带在分离胶里。
可以尝试下银染色,灵敏度远高于考马斯亮蓝染色
应该是蛋白质的问题