谁知道ELISA,Western Blot,免疫组化 这三个比较有什么区别,越详细越好!谢谢了,我给加分
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/26 14:50:49
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免疫组化
是融合了免疫学原理（抗原抗体特异性结合）和组织学技术（组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等）,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素)显色,来对组织（细胞）内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位).样本是细胞或组织,要在显微镜下观察结果,可能出现膜阳性、质阳性和核阳性.
elisa（酶联免疫吸附试验）
用到了免疫学原理和化学反应显色,待测的样品多是血清、血浆、尿液、细胞或组织培养上清液,因而没有用到组织包埋、切片等技术,这是与免疫组化的主要区别,操作上 开始需要将抗原或抗体结合到固相载体表面,从而使后来形成的抗原-抗体-酶-底物复合物粘附在载体上,这就是“吸附”的含义.
免疫组化和elisa所用到的原理 大致相同,只是因为所检测的样品不同,从而在操作方法上有所不同.Elisa多用于定量分析,其灵敏度非常高.
western bolt
先要进行SDS-PAGE,然后将分离开的蛋白质样品用电转仪转移到固相载体上,而后利用抗原-抗体-标记物显色来检测样品,可以用于定性和半定量.
免疫学三大工具,免疫组化、Western、ELISA,分别用于定位,定性和定量.
以下western和Elisa的区别不是原创,是找的资料.
western blotting 可以看到特异性的条带,但是定量比较烦
elisa可以直接读出浓度,但是如果抗体有非特异性结合,那得到的数值就不可信.
WB只能半定量,但是可以检测细胞膜蛋白,这点ELISA做不到
ELISA可用定量方法检测蛋白,也就是说可以观察不同浓度刺激物对目的蛋白的影响
WB所检测的一般是抗原,而Elisa抗原抗体都可以检测.
WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小,或是否是多聚体、降解产物等,一句话,WB可以确定所用抗体是与那种蛋白起作用的；而Elisa无能为力,一锅端了.
WB所适用的一抗一般是线性位点的,ELISA线性或构象型抗体都可以使用.从另一个意义上讲,WB可以做抗体是线性位点还是构象型位点的补充判定,而Elisa不行.
WB一次处理量就是一块胶版,10-20个样品最多了.Elisa一块96孔板一次可以处理96个样本,可以设置多个复孔、对照、梯度样等来提高检测的可信度.
WB操作常见的非特异性条带,膜本底差,显色不好等等缺点在Elisa上表现得要好得多.
我也是最近才开始了解这几种实验技术,答案仅供参考哟~
找德元国际，他们做这方面实验