为什么说离子交换色谱法是分离蛋白质的最佳方法?论述腺苷酸及其衍生物在细胞代谢中的作用和地位
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/26 12:10:05
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为什么说离子交换色谱法是分离蛋白质的最佳方法?
论述腺苷酸及其衍生物在细胞代谢中的作用和地位
为什么说离子交换色谱法是分离蛋白质的最佳方法?论述腺苷酸及其衍生物在细胞代谢中的作用和地位
它是根据蛋白质的组成物质氨基酸的物理性质(基于氨基酸电荷行为)为分离基础的方法.相对透析和超过滤及凝胶过滤来说,可以针对多种蛋白质中的某一种(前提是知道蛋白质的氨基酸组成及其离子交换树脂的亲和度及洗脱强度)进行分离.(而透析和超过滤还有凝胶过滤方法更大的取决于相对分子质量及其结构 分离出的单一蛋白质纯度相对要低 并且凝胶过滤要求凝胶对要求组分不能有吸附作用 适用性较低 ) 相对盐溶和盐析来说,分离单一蛋白质的纯度要高,且更好的保留其天然理化性(盐溶要求蛋白质分子吸附某一盐离子从而改变其溶解性 但有些蛋白质吸附某些盐离子后其蛋白质构象及理化性会发生改变).相对有机溶剂分级分离法,更好的保留其天然理化性(有机溶剂分类法易造成蛋白质不可逆变形 且适用范围窄) 相对凝胶电泳和等电聚焦来说 更易于实现大量制备分离 且不改变蛋白质结构和功能(电泳会影响蛋白质结构 且操作繁琐 成本高) 相对亲和层析来说 它更加易于实现且成本低廉效果也不错(亲和层析需要制备其配体并与载体交联 因而制备难且成本较高)
PS:最好的分离方法不是例子交换色谱法 而是高效液相色谱法 相对离子交换色谱来说有着更高的效率、更高的分辨率和过柱速度
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关于液相色谱法纯化蛋白质我想知道凝胶过滤色谱、离子交换色谱、亲和色谱、疏水色谱,这四种色谱相比,它们各自的优缺点,还有各自适合分离纯化什么蛋白?答得好追加分数!
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