蛋白质的提取中如何确定目的蛋白?
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/23 16:56:47
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蛋白质的提取中如何确定目的蛋白?
蛋白质的提取中如何确定目的蛋白?
蛋白质的提取中如何确定目的蛋白?
鉴定目的蛋白?看自身特点性质.最直接的,分子量,跑PAGE看大小,还有极性,等电点,
如果有抗体,用抗体鉴定,做Western等等,或者质谱,测序.
如果蛋白有纯化标签并且是过表达的话就比较容易判断，一般纯化过程中通过SDS电泳不同组分确定目的蛋白。如果没有纯化标签，一般是通过SDS电泳或者双向电泳和蛋白活性实验(如果蛋白有生物活性，比如酶)，或者通过western blot来确定目的蛋白。如果再想精确的话，就是N端测序或者做肽谱。那如果用分光度仪呢？是不是峰值高的地方蛋白含量多？我想问你怎么用的分光光度计，我做了这么多年蛋白没有听说过用分光光...
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如果蛋白有纯化标签并且是过表达的话就比较容易判断，一般纯化过程中通过SDS电泳不同组分确定目的蛋白。如果没有纯化标签，一般是通过SDS电泳或者双向电泳和蛋白活性实验(如果蛋白有生物活性，比如酶)，或者通过western blot来确定目的蛋白。如果再想精确的话，就是N端测序或者做肽谱。
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做分子量大小鉴定 ，质谱就可以做精密分子量分析。PAGE预测分子量存在很大差异，再一方面，western blotting具有不可重复性，效果不好，我做过。希望帮到你。
做western blot或ELISA
简而言之 分光度仪是不可以的 只能打质谱或者western标抗体
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