几种柱层析的特点和在纯化工艺中的选择

来源：学生作业帮助网编辑：六六作业网时间：2024/12/24 10:28:57

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收藏推荐在过去的三十年中,分离生物大分子的各种技术和方法得到了不断的发展.随着各种介质的完善和商品化,使以填料为核心的柱层析技术在蛋白质等粗提后的纯化中起到了重要作用.本文在一定范围内,仅就其中几种最常用柱层析的特点和在纯化中的选择应用作一综述.一、几种柱层析的特点1凝胶过滤柱层析(ＧｅｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ,ＧＦＣ)ＧＦＣ是以分子大小和形状为分离基础的.具体说就是利用不同大小分子通过凝胶滞留时间的差别来分离混合物的柱层析方法.另外一种说法是分离是以分子体积的大小为基础的,分子体积即分子溶剂化后的体积,受分子形状和相对分子质量两方面因素的影响.有时加入变性剂(尿素、盐酸胍等)以破坏蛋白质的三、四级结构,可以使分离主要受控于相对分子质量的大小.ＧＦＣ特别适用于分离相对分子质量大于2000的高分子化合物和相对分子质量差异大的混合物及低聚物.ＧＦＣ的分离不依赖于流动相和固定相的相互作用,所以不必使用梯度洗脱.但是由于电荷屏蔽的因素,为了降低填料与生物分子之间的相互作用,往往会适当提高盐浓度,至少高于005ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ.

几种柱层析的特点和在纯化工艺中的选择几种柱层析的特点和在纯化工艺中的选择蔗糖酶的第二步层析纯化在采用了Q Sepharose（离子交换层析）柱层析法后,还可以采用什么层析方法能够继续提纯?选择的理由是什么呢?求教ww 做酶的分离纯化是做离子交换和凝胶层析时使用普通的玻璃层析柱,只选择填料行不行? 在众多的蛋白质分离纯化技术中 ,离子交换层析是一门关键技术 ,和其它分离技术相比硅胶柱层析在分离纯化中药成分当中,对硅胶的预处理有什么要求?对柱子的选择有什么规定? 纸层析的特点我要分离纯化一种未知酶,一切未知,想用凝胶层析和离子交换层析分离,不知选用什么填料合适?有好的建议亲和层析一般用于纯化的哪个阶段? 纸层析和柱层析薄层层析高效液相层析各有什么特点? 利用硅胶柱柱层析对化合物进行纯化分离的干法装柱和湿法装柱的优缺点是什么甘氨酸、缬氨酸和丙氨酸分别在纸层析中的层析行为如何? 利用硅胶柱柱层析对化合物进行纯化分离li何种条件下优先选择干法上样薄层层析和纸层析的异同亲和层析和反向层析的关系细菌荚膜多糖的作用和应用以及提取纯化工艺.急用. 如何根据薄层层析选择柱层析的洗脱剂如何根据薄层层析选择柱层析的洗脱剂