pcr退火温度太高有什么缺点pcr的引物如果很长,导致tm值很高,这样扩增的退火温度就会很高,如达到65-70℃,会不会导致模板正反链的复性,从而导致扩增效率降低?

来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/11/22 01:54:06
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pcr退火温度太高有什么缺点
pcr的引物如果很长,导致tm值很高,这样扩增的退火温度就会很高,如达到65-70℃,会不会导致模板正反链的复性,从而导致扩增效率降低?

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说影响得看情况,退火温度太高肯定会影响引物的结合效率的.但是,实际上,好的引物一般是上下游引物的退火温度比较接近.有时候,我们可能会通过牺牲特异性的手段（当GC含量过高时,减少引物长度）来平衡两条引物的退火温度.
高的退火温度是不利于复性的,所以不会因为使模板复性而降低扩增效率,倒是可能因为影响引物结合而降低扩增效率.不过65度应该没什么问题.我还是觉得两条引物退火温度一致最重要!

pcr退火温度太高有什么缺点pcr的引物如果很长,导致tm值很高,这样扩增的退火温度就会很高,如达到65-70℃,会不会导致模板正反链的复性,从而导致扩增效率降低? PCR过程中引物的碱基数量与种类 和 退火温度有什么关系?理由 ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗? PCR引物的发卡结构和二聚体可以通过提高退火温度克服吗 PCR引物的发卡结构和二聚体可以通过提高退火温度克服吗 pcr退火温度是根据什么原则设计的 PCR反应退火温度的高低与什么因素有关 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? ISSR-PCR的退火温度怎么设计? PCR的退火温度怎么设定 PCR的退火温度怎么选择 退火温度低会对PCR产生什么影响?我做菌落PCR,使用一个特异性上游引物和一个T7下游通用引物,退火温度用的是较低的48度,但引物的Tm分别为57,71,阳性对照都没有出结果,请问是怎么回事呢?退火 退火温度递减的PCR程序叫什么比如PCR退火温度是55 然后每个循环退火温度降低1度 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? pcr退火温度怎么确定? pcr退火温度怎么确定 PCR退火温度不稳定是什么原因? PCR退火温度不稳定是什么原因?