脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么?这是我们的一道考试题。能叙述原理吗?再谢!
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/25 04:05:23
脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么?这是我们的一道考试题。能叙述原理吗?再谢!
脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么?
这是我们的一道考试题。能叙述原理吗?再谢!
脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么?这是我们的一道考试题。能叙述原理吗?再谢!
我是高中的..我们接触到的就是这个.
这个是动物细胞融合技术那章的吧
放在选择性培养基上培养..杂交到的细胞有 3种 脾细胞和脾细胞,脾细胞和瘤细胞,瘤细胞和瘤细胞.3种 ..放在选择性培养基上连续培养.
比如说有什么脾细胞可以分泌出抗体那种抗原的物质...而其他细胞不能够抵抗..脾细胞和脾细胞 一般不会培养到50代..就会死了..放在选择性培养基上的瘤细胞和瘤细胞 没有相应的抗体 所以自动被消灭掉..脾细胞和瘤细胞..因为具有无限繁殖和有抗体产生 所以能够存活.存活下来的 就是合格的杂交瘤细胞..
一般筛选2次...
你回答就这么说好了 ..
把杂交瘤细胞放在特定的培养基上培养....只有杂交瘤细胞才能在特定的培养基上繁殖..分裂
睡觉.
继续培养
杂交瘤细胞能够无限增殖,其他细胞培养一定得代数九死亡了。
先得谢谢这个问题,我是学竞赛的,又知道了点知识啊
单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的。
第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷酸(T)。其依据...
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先得谢谢这个问题,我是学竞赛的,又知道了点知识啊
单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的。
第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷酸(T)。其依据是细胞中的DNA合成有两条途径:一条途径是生物合成途径(“D途径”),即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸,为DNA分子的合成提供原料。在此合成过程中,叶酸作为重要的辅酶参与这一过程,而HAT培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物,可以阻断DNA合成的“D途径”。另一条途径是应急途径或补救途径(“S途径”),它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸,两种酶缺一不可。因此,在HAT培养液中,未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合的“D途径”被氨基喋呤阻断,虽“S途径”正常,但因缺乏在体外培养液中增殖的能力,一般10d左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言,由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型(HGPRT)细胞,因此自身没有“S途径”,且“D途径”又被氨基喋呤阻断,所以在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。惟有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞,既具有效应B细胞的“S途径”,又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性,因此能在HAT培养液中选择性存活下来,并不断增殖。
第二次筛选的原理和方法:在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的,经HAT培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异,所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞。通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔的细胞培养板上,使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞(理论上30%的孔中细胞数为0时,才能保证有些孔中是单个细胞),再由这些单细胞克隆生长,最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。因此,单克隆抗体制备过程中,两次筛选的原理和方法是不相同的。
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一楼误人子弟。第一次筛选是为了选出杂交瘤细胞。是根据B细胞和瘤细胞的DNA合成途径不同,筛选出杂交瘤细胞。第二次筛选是为了选出产生特定抗体的杂交瘤细胞,原理是抗原抗体特异性结合。具体请参考http://wenku.baidu.com/view/a9696ff3f90f76c661371ab9.html。
一楼所说的第一次筛选原理真是太。。。瘤细胞会被抗原杀死吗?童鞋这样的答案你也信了...
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一楼误人子弟。第一次筛选是为了选出杂交瘤细胞。是根据B细胞和瘤细胞的DNA合成途径不同,筛选出杂交瘤细胞。第二次筛选是为了选出产生特定抗体的杂交瘤细胞,原理是抗原抗体特异性结合。具体请参考http://wenku.baidu.com/view/a9696ff3f90f76c661371ab9.html。
一楼所说的第一次筛选原理真是太。。。瘤细胞会被抗原杀死吗?童鞋这样的答案你也信了
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