血液DNA提取过程中,取上清应注意事项.能不能把上清都取出?红细胞DNA提取的原理石什么?每步加的试剂都有哪些作用?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/15 20:02:20
血液DNA提取过程中,取上清应注意事项.能不能把上清都取出?红细胞DNA提取的原理石什么?每步加的试剂都有哪些作用?
血液DNA提取过程中,取上清应注意事项.
能不能把上清都取出?
红细胞DNA提取的原理石什么?每步加的试剂都有哪些作用?
血液DNA提取过程中,取上清应注意事项.能不能把上清都取出?红细胞DNA提取的原理石什么?每步加的试剂都有哪些作用?
一个方向快速搅拌
冷冻,沉淀
不需要把上清都取出,以免得到太多杂质
DNA基本在上清中
应该可以
过程:将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.
注意:<...
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过程:将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.
注意:
1. 各操作步骤要轻柔,尽量减少DNA的人为降解。
2. 取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰。
3.提取DNA过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。
4.所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
收起
DNA就是在上面的血清中,是应该全部取出的,但是在提取过程中,会很容易吸出下面的东西,所以一般不会全部取出。吸取上清时应尽量慢些。
你把枪头打到一定的数值的时候,小心吸取,就能得到最多的DNA上清
如果你能确保不会吸到下层物质,当然是吸出的越多得率越高。但是一般越靠近分界面越难吸,容易吸到下层物质造成污染,使产物的纯度降低,所以一般不会全部吸出。