请设计一个实验,从生物体内克隆一个功能基因,并对所克隆的基因及其表达产物进行全面鉴定.
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/23 04:47:07
请设计一个实验,从生物体内克隆一个功能基因,并对所克隆的基因及其表达产物进行全面鉴定.
请设计一个实验,从生物体内克隆一个功能基因,并对所克隆的基因及其表达产物进行全面鉴定.
请设计一个实验,从生物体内克隆一个功能基因,并对所克隆的基因及其表达产物进行全面鉴定.
这个问题 我个人有几个疑问
一是 这个功能基因是你的目标基因还是随便一个都可以
二是 这个功能基因片段是否已知
三是 这个生物体是多细胞还是单细胞,对其克隆是否可以进行破坏.
如果是未知基因的话我没有办法：因为我原本设想的是从表达产物入手反向推测看看是不是可以找到答案,结果却是不可能,因为反向配对结果过多而切在原体中是不是这样也不知道,推测出来的基因稳定如何未知,所以即使用反向推测不见得能完成对未知基因的寻找或制作.
如果你的问题是我以上内容,那么下面的内容对你的用处不大
（以下做法仅限于高中知识范畴同时是在相对现实极为理想的条件下进行）所以我就假设你的问题是理想条件：已知基因,或是已知基因位置极其表现型.可以提供我所需要的所有物品（可能不切实际）.
先对所有基因进行标记,然后破坏细胞获取该生物体的所有细胞.
接下来是对基因进行切片（就是用对应且不对目的基因有所破坏的限制内切酶）,之后进行分离（因为你切下来的基因有自己的质量我想是否可以用离心运动的方法对把基因分离出来,当然分离出来的肯定不是纯净物）,分离以后在用PCR技术对其进行扩增,完成之后用相同的内切酶对载体进行切割（根据你提供的生物体来决定载体,动物有动物载体,植物有植物载体）.然后用连接酶连接导入载体,最后把载体导入目标细胞（这一系类过程中因为前面引入了很多未知量并且要考虑导入的成功率,所以导入目标细胞以后,可能出现的情况是得到的表达产物极少）.
这个实验是必须要有分组的,就是在分离以后分成几组（建议为10组）进行PCR.完成之后还要各组留下一半,把另一半导入载体.这样在有了表达产物比例以后,我们可以很快的找到对应小组原来的那一部分,再进行纯化.
但纯化达一定地步的时候你已经得到你想要的克隆基因组.同时其表达产物就是你先要找的东西.
以上是知道基因和表达产物是什么的实验方法.（纯属个人见解,个人编写,如有错误敬请谅解）
还有就是对可分离但未知的功能基因（都是未知基因怎么会知道他是功能基因呢?）,和未知其表达产物的鉴定
(今天太迟了明天继续,不过我不保证我可以想出什么方法来,毕竟我不是读生物这个专业的,很多东西是根据以前知识进行推测,所有方法仅供参考)
抱歉来的晚了一些
因为条件是可分离的基因,所以我用的还是限制性内切酶对其进行切割,得到基因片段后扩增,并且检测排序（个人觉得现在应该有这种技术,具体叫什么不知道）.之后用和上面同样的方法把基因植入对应的目标细胞后,看其表现.如果是分泌一种蛋白质那么就去检测蛋白质,如果是一种表现性,那么观察其表现.现在有一种技术可以看出蛋白质的空间结构,用着东西可以知道获得的是什么蛋白质.
这一实验方法和上面一种区别不大主要是对未知东西的鉴别,但思前想后我实在想不出什么方法可以准确验证的.
所以只能感叹本人才能有限
但希望所写的对楼主有用
呵呵
希望楼主好好加油
O了
如果可以给我最佳吧
buzhdi .;