请设计一个实验,从生物体内克隆一个功能基因,并对所克隆的基因及其表达产物进行全面鉴定.
来源：学生作业帮助网 编辑：六六作业网 时间：2024/12/22 23:47:25
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首先确定要克隆基因的基因序列,然后设计引物（引物上带有酶切位点）→进行PCR,胶回收,酶切,再胶回收,得到带有粘性末端的目的基因→将目的片段连接到具有相同粘性末端的PET载体上
．得到目的蛋白：将连接好的带有目的片段的载体转入到DH5α菌系中,将菌涂布与相应的抗性LB培养过夜→挑菌→接到相应抗性的液态LB中,摇菌过夜→提取质粒,进行PCR鉴定与酶切鉴定确定转入的不是空质粒→送测→将的到地带有目的蛋白基因的质粒转入到BL21（DE3）菌系中→诱导表达蛋白→进行SDS-PAGE检测是否表达出正确大小目的蛋白→大量诱导→得到表达蛋白的DE3
.纯化目的蛋白：将菌进行超声破碎→引用Ni-His结合树脂4℃结合过夜→应用不同洗液洗脱得到纯化的目的蛋白→应用BSA对蛋白含量进行定量
应用得到的纯化目的蛋白150mg目的蛋白+弗氏完全佐剂对兔子进行一免,以后每次应用150mg目的蛋白+弗氏不完全佐剂加强免疫2-3次（两周加强一次）→最后一次免疫10天后采血→这样就制备得到兔高免血清
.纯化抗体（可做可不做）：应用抗体纯化试剂盒对得到的血清进行纯化,得到纯化的兔免目的蛋白的多克隆抗
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请设计一个生物测交实验.
设计一个基因克隆的实验方案
拟南芥中某一基因,该基因的产物能与蛋白X相互作用,请设计一个实验,从拟南芥中克隆该基因
设计一个实验,提DNA,并克隆,表达急 谢谢
设计一个实验进行特定基因的克隆测序
如何研究一个小数DNA结合蛋白的生物学功能.1.请设计实验确定其拜年吗基因在小数内的表达水平.2.请设计实验确定该蛋白的那个结构域具有DNA结合功能.3.如何确定该蛋白在小数体内的功能.
设计一个简单的生物实验.请帮忙设计一个简单的可以在家里实行的实验.
请设计一个实验,证明昆虫的触角具有触觉功能.
请设计一个实验,证明昆虫的触角具有触觉功能
设计一个实验,证明植物体内有水急!1
葡萄酒发酵是一个生物参与的过程,请设计一个简单的实验来证明
设计实验克隆基因查询基因序列数据库,检索获得烟草肌动蛋白基因的完整序列.请设计实验方案从烟草中克隆该基因.
设计一个实验来证明,已经从线粒体中纯化出了一种蛋白复合体,并认为你纯化得到的就是ATP合酶你的设想请综合利用生物膜、跨膜离子的运输及生物体内能量产生等知识
两道科学设计实验题1.设计实验,证明植物体内含有水.2.怎样证明水中溶有氧气?请设计一个简单的实验方案,并完成实验.
如题,请设计一个鱼消化酶活力测定的实验方案.从如何从鱼体内提取分离出几种常规消化酶开始到各种酶的活力鉴定的全过程.
试设计一个实验,来克隆鉴定调控两近源物种某一差异性状的基因