Southern Blot实验中,洗液、预杂交液、杂交液都保持在同一温度有什么好处
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2025/01/25 07:08:14
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在Southern blot试验中,预杂交的目的是将硝酸纤维素膜上的非特异结合DNA位点使用与目的DNA同源性较差的分子(鲑鱼精子DNA或者牛血清等)进行封闭,洗膜则是为了将未能特异性结合的DNA分子洗脱;预杂交、杂交两者处理温度相同,可以确保在目标DNA的杂交温度(约为Tm值-10℃)条件下,非特异性位点能够充分封闭,从而提高实验准确性;洗膜温度可以与杂交温度相同,也可进行梯度洗脱,总的来说,离子强度大,洗脱温度高,则实验精确性越高.
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