蛋白双向电泳 平衡液配置好了可低温保存多久
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/22 17:18:40
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IPG 胶条平衡两次,每次15 分钟.平衡缓冲液包括6 M 尿素和30% 甘油,会减少电内渗,有利于蛋白从第一向到第二向的转移.第一步平衡在平衡液中加入DTT,使变性的非烷基化的蛋白处于还原状态;第二步平衡步骤中加入碘乙酰胺,使蛋白质巯烷基化,防止它们在电泳过程中重新氧化,碘乙酰胺并且能使残留的DTT 烷基化(银染过程中,DTT 会导致点拖尾"point streaking") .将IPG 胶条轻轻润洗,并去除多余的平衡缓冲液,然后放入第二向SDS 胶中.
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