关于单酶切,片段和载体在进行单酶切的时候，是不是载体和片段同时要去磷酸化，想请教有做过这方面实验的达人，

关于单酶切,片段和载体在进行单酶切的时候，是不是载体和片段同时要去磷酸化，想请教有做过这方面实验的达人， 处理DNA（包括载体酶切和目的片段获得的片段）后的平滑末端还需要去磷酸化吗?例如：载体经Sma I单酶切之后形成平滑末端，还需要去磷酸化吗？ 影响质粒载体进行外源DNA片段克隆是主要考虑的有哪些因素 为什么载体和DNA片段都要酶切? 大片段连接我载体有氨苄和链霉素抗性,大约8000bp,片段有氯霉素抗性,4500bp,都是经过BamHI单酶切回收的,现在连接以后转化于3种抗生素的平板上,一直都不长,4度和16度都试过了,载体要去磷酸化 关于信息,下列说法不正确的是A信息需要依附于载体而存在B两个人进行交谈或讨论也是在互相传递信息C传递和获得信息的途径可以有很多种D信息必须通过载体而传播信息与载体种类也存在 为什么抽提的质粒大于目的片段和载体的和 双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶切位点,但现在将T载体进行双酶切,缺总是切不完全,只有大约1/3的载体被切开,所以200bp的条 pGEM-T载体的通用引物序列有哪些,pcr得到的片段长度是多少使用pGEM－T载体克隆了一段500bp的片段,想通过pcr后再酶切分型,筛选用于测序的样品.但在做pcr的时候不知道采用什么样的引物可以得 穿刺菌去测序的原理和步骤是什么?特别想知道,他们是怎么切出我连在载体上的目的片段的. 如何根据电泳图确定载体和目的片段的加入量 关于真核载体的构建真核载体的构建的要点和基本原则是什么表达载体 有没有软件分析目的片段酶切位点来自动选择载体?人工看载体上的酶切位点和片段的酶切位点一个个对照太慢了,有没有软件能自动找合适的载体的? 在用原核载体和真核载体来构建载体的时候,所用到的内切酶、solution Ⅰ等buffer这些试剂是不是通用的?换句话说,在用不同的载体来构建重组质粒的时候,用的这些试剂有没有什么区别,还是可 关于“筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含__的培养基上进行”疑问我刚学生物科技.是这样的,这种题,好像载体（大肠杆菌）上都有两种以上的抗性基因,比如抗四环素和抗青霉素,然后 lba4404载体和eha105载体的区别 转化pET32a一个菌落也不长是什么原因啊我在做分子克隆,克隆了四个片段,要在pET32a载体上表达,可是酶切,连接,转化大肠杆菌BL21以后一个菌落也不长,我已经试过各种载体和目的片段的比例,而 在基因工程研究和应用中,为什么必须使用载体来克隆外源DNA片段?详细一点