有关PCR技术的疑问:为何在低温退火时,原来的两条DNA链不会结合?RT.高温使得原DNA链解旋,那么在第二步低温退火时,为何单链只与引物结合,而不与原互补链结合呢?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/11/29 14:58:08
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有关PCR技术的疑问:为何在低温退火时,原来的两条DNA链不会结合?
RT.高温使得原DNA链解旋,那么在第二步低温退火时,为何单链只与引物结合,而不与原互补链结合呢?
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因为引物要远小于模版长度,因此在退火温度下引物更容易结合到模板链上.也就是说,引物单链和模板单链共同竞争模板单链,但是由于引物小,摩尔浓度高,因此引物要远远优先结合于模板DNA.
也会结合,但是引物的长度较短,较容易结合。但是如果模板的GC较高,引物就较难结合了
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