PCR的引物怎样选取?
来源:学生作业帮助网 编辑:六六作业网 时间:2024/12/23 10:57:58
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PCR的引物怎样选取?
PCR的引物怎样选取?
PCR的引物怎样选取?
用oligo软件根据你要扩增的基因设计引物:
1.引物长度一般在15到30个碱基,常用的是18-27 bp,但不应大于38.
2.GC含量应该在40%以上,上下游引物的GC含量不能相差太大.
3.引物所对应模板位置序列的Tm 值在72℃左右可使复性条件最佳.
4.引物二聚体及发夹结构的能值过高(超过4.5kcal/mol)易导致产生引物二聚体带,并且降低引物有效浓度而使PCR 反应不能正常进行.
扩增PCR的引物除了通用引物,如16S,18S之外,都是要自己设计的,要根据你要扩增的基因设计一对引物
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