做western处理蛋白时煮过头了会蛋白降解吗?做western,收下来的蛋白加好loading buffer后98度煮了一个小时...期间盖子盖紧了水分没有跑掉请问这样子的蛋白样品还能用吗?

做western处理蛋白时煮过头了会蛋白降解吗?做western,收下来的蛋白加好loading buffer后98度煮了一个小时...期间盖子盖紧了水分没有跑掉请问这样子的蛋白样品还能用吗? 做western blot时,蛋白降解后转膜以后是什么样 做Western时如何判断蛋白是否降解? 做western蛋白浓度太小怎么办? western内参选择我做的是组织样品,但由于处理时可能会引起细胞凋亡而使骨架蛋白如tublin或actin损失,而有的样品不做这样的处理.那选这两个做内参就不合适了.我想请教下是否有其他的蛋白可 做western 之前,提的蛋白为什么要煮一下,具体作用是什么啊? 做western bloting 如何确定蛋白样品的体积 western 做电泳前为什么要测蛋白浓度 做western之前怎样确定检测蛋白的分子量, 细胞蛋白如何提取?做western blot的 细胞蛋白如何提取 做western蛋白一煮不就失活了吗,还怎么反应蛋白一加热不就失活破坏了吗,那还怎么反应,比如单抗 做western blot时上样量过高会导致类似于PCR的平台期而掩盖目的蛋白的趋势么?为什么? 做Western blot ,煮蛋白样,结果变成了黄绿色,怎么回事?做Western blot ,煮蛋白样,结果沉淀中的蛋白样品煮了1min后变成了黄绿色,怎么回事?有没有人遇到过这种情况啊? 做了蛋白线提升 蛋白定量时western和ELISA哪个好 western blot里面蛋白变性,那么这样的蛋白失去了活性,为什么还能和抗体蛋白结合?蛋白构想不是改变了吗? 大鼠的肺组织做western前怎么处理,我的其中要检测的蛋白有磷酸化的,需要加磷酸酶抑制剂吗? 磷酸化蛋白指的是什么?怎么知道自己做的蛋白是磷酸化蛋白?我做的是western blotJAK 和stat是不是磷酸化因子？